目的 观察吡格列酮对新生大鼠成骨细胞增殖、凋亡及分化的影响,并初步探讨相关分子机制.方法 获取新生大鼠颅骨成骨细胞,应用倒置显微镜观察并通过茜素红染色鉴定.将第3代成骨细胞接种至含不同浓度吡格列酮(0、10、20、40 μmol/L)的培养基中培养.应用MTT实验检测成骨细胞活性.应用Hoechst33258染色检测细胞凋亡.应用碱性磷酸酶(ALP)活性检测和钙结节染色评估吡格列酮对成骨细胞分化能力的影响.应用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹评估吡格列酮对成骨细胞内BMP-2、Runx2、OSX等成骨分化相关基因和蛋白表达的影响.应用蛋白免疫印迹评估p38和ERK1/2信号通路内相关蛋白表达情况.结果 随着吡格列酮(0、10、20、40 μmol/L)浓度的增加,各组细胞活性逐渐降低(F=282.629,P<0.01).与空白对照组(0μmol/L)相比,经10、20 μmol/L吡格列酮处理组荧光阳性成骨细胞数量减少(P<0.05).与空白对照组及吡格列酮10μmol/L组、20 μmol/L组相比,吡格列酮40 μmol/L组荧光阳性成骨细胞数量显著增多(P<0.05).随着吡格列酮(0、10、20、40 μmol/L)浓度的增加,各组细胞ALP活性逐渐降低(F=64.247,P<0.01).随着吡格列酮浓度的增加,钙化结节数量逐渐增多(F=672.644,P<0.01).与空白对照组相比,经10、20、40 μmol/L吡格列酮处理
作者:刘永立;程富礼;景小博;王来喜
来源:实用药物与临床 2018 年 21卷 6期