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目的 探讨Akt信号通路在白蛋白刺激人肾小管上皮细胞(HK-2)分泌单核细胞趋化因子-1(MCP-1)和核因子-κB(NF-κB)表达的作用.方法 体外培养HK-2细胞,分别加入不同质量浓度白蛋白(5,15,30 mg/mL)白蛋白和/或Akt抑制剂Ly294002.应用RT-PCR方法测定MCP-1mRNA表达,Western blot测定Akt和MCP-1蛋白的表达.应用凝胶电泳迁移率(EMSA)检测NF-κB活化.两两比较用q检验.结果 白蛋白呈浓度依赖性上调肾小管上皮细胞MCP-1mRNA表达[对照组:0.233±0.01,BSA组(5 mg/mL):0.285±0.04;BSA组(15 mg/mL):0.387±0.02;BSA组(30mg/mL):0.473±0.05;BSA(30 mg/mL)+Ly294002组:0.325±0.05,P<0.05].MCP-1蛋白表达也增加[对照组:100±15.1,BSA组(5 mg/mL):148±19.3;BSA组(15 mg/mL):176±20.7;BSA组(30 mg/mL):263±18.1;BSA(30 mg/mL)+Ly294002组:175±18.0,P<0.05].白蛋白激活NF-κB活性,增加磷酸化Akt表达.Ly294002能够抑制白蛋白引起的NF-κB活性以及MCP-1的表达.NF-κB活化与MCP-1表达呈显著正相关(r=0.68,P<0.05).结论 白蛋白刺激肾小管上皮细胞分泌MCP-1和NF-κB的活性,其机制部分依赖于Akt的磷酸化作用.

作者:杨玲;高苹;司晓芸;陈玲;水华

来源:中华急诊医学杂志 2011 年 20卷 2期

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作者:
杨玲;高苹;司晓芸;陈玲;水华
来源:
中华急诊医学杂志 2011 年 20卷 2期
标签:
肾小管上皮细胞 单核细胞趋化因子-1 核因子-κB Akt信号通路 白蛋白 细胞培养 信号传导 Ly294002 Renal tubular epithelial cells Monocyte chemoattractant protein-1 Nuclear transcription factor-κB Akt signal pathway Albumin Cell culture Signal transduction Ly294002
目的 探讨Akt信号通路在白蛋白刺激人肾小管上皮细胞(HK-2)分泌单核细胞趋化因子-1(MCP-1)和核因子-κB(NF-κB)表达的作用.方法 体外培养HK-2细胞,分别加入不同质量浓度白蛋白(5,15,30 mg/mL)白蛋白和/或Akt抑制剂Ly294002.应用RT-PCR方法测定MCP-1mRNA表达,Western blot测定Akt和MCP-1蛋白的表达.应用凝胶电泳迁移率(EMSA)检测NF-κB活化.两两比较用q检验.结果 白蛋白呈浓度依赖性上调肾小管上皮细胞MCP-1mRNA表达[对照组:0.233±0.01,BSA组(5 mg/mL):0.285±0.04;BSA组(15 mg/mL):0.387±0.02;BSA组(30mg/mL):0.473±0.05;BSA(30 mg/mL)+Ly294002组:0.325±0.05,P<0.05].MCP-1蛋白表达也增加[对照组:100±15.1,BSA组(5 mg/mL):148±19.3;BSA组(15 mg/mL):176±20.7;BSA组(30 mg/mL):263±18.1;BSA(30 mg/mL)+Ly294002组:175±18.0,P<0.05].白蛋白激活NF-κB活性,增加磷酸化Akt表达.Ly294002能够抑制白蛋白引起的NF-κB活性以及MCP-1的表达.NF-κB活化与MCP-1表达呈显著正相关(r=0.68,P<0.05).结论 白蛋白刺激肾小管上皮细胞分泌MCP-1和NF-κB的活性,其机制部分依赖于Akt的磷酸化作用.