目的 探讨靶向沉默Notch 1、2和3基因对动脉粥样硬化患者巨噬细胞内Notch信号通路关键基因Delta-like 4(DLL4)、Jagged 1和核因子-κB (NF-κB)信号通路关键基因IκBα、p52表达的影响,从基因层面研究防治动脉粥样硬化的方法.方法 采集冠状动脉粥样硬化患者静脉血后体外分离单核细胞,并诱导转化为巨噬细胞.将巨噬细胞分为5组:空白对照组(未转染siRNA)、阴性对照组(转染NC-siRNA)、Notch1-siRNA组(转染Notch1-siRNA)、Notch2-siRNA组(转染Notch2-siRNA)和Notch3-siRNA组(转染Notch3-siRNA).分别采用RT-PCR和Western blot法检测各组DLL4、Jagged 1、IκBα和p52的mRNA和蛋白相对表达水平,采用电泳迁移率变动分析(EMSA)检测各组NF-κB活性,采用免疫荧光法检测各组巨噬细胞内p52的分布.结果 (1)RT-PCR和Westernblot检测显示,Notch1-siRNA组、Notch2-siRNA组和Notch3-siRNA组DLL4、Jagged 1和p52的mRNA和蛋白相对表达水平均低于空白对照组和阴性对照组,而IκBα的mRNA和蛋白相对表达水平均高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05或0.01);Notch1-siRNA组DLL4、Jagged 1和p52的mRNA和蛋白相对表达水平均低于Notch2-siRNA组和Notch3-siRNA组,IκBα的mRNA和蛋白相对表达水平均高于Notch2-siRNA组和Notch3-siRNA组(P
作者:阮中宝;傅行礼;李伟;叶军;王如珠;殷屹岗;朱莉
来源:中华心血管病杂志 2016 年 44卷 9期