目的 观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和microRNA-146a在脂多糖(LPS)诱导的NR8383肺泡巨噬细胞中的动态表达,分析二者在时间上的变化关系,探讨mieroRNA-146a对肺泡巨噬细胞炎症反应的调控作用及其机制.方法 体外培养的肺泡巨噬细胞接种于六孔板,贴壁后加入1μg/mL的LPS,刺激0、3、6、12 h后离心收集培养上清液和细胞.采用实时荧光定量PCR检测细胞中microRNA-146a和TNF-α mRNA的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测培养上清液中TNF-α蛋白水平的表达.microRNA-146a和TNF-α mRNA的相关性采用双变量Pearson相关性分析.结果 (1)培养上清液中的TNF-α蛋白在LPS刺激3h后显著升高[(359.80±57.54) pg/mL,P＜0.01],于12 h达高峰[(729.22±50.40) pg/ml,P＜0.01]; (2) LPS刺激3h后,细胞中TNF-α mRNA的表达即达到顶峰[(67.48±24.52)倍,P＜0.01],6h后开始降低[(29.53±4.26)倍,P＜0.05]；(3)LPS刺激6h后,microRNA-146a表达水平显著增高[(5.33±0.81)倍,P＜0.01],并且持续增高[12h:(8.21±1.19)倍,P＜0.01]；(4)细胞中microRNA-146a 的表达水平与TNF-α mRNA的含量呈负相关(r=-0.895,P＜0.01).结论 在LPS诱导的肺泡巨噬细胞中,microRNA-146a的表达水平与TNF-α mRNA的含量呈负相关,推测microRNA-146a可能参与了肺泡巨

作者：曾振国；龚洪翰；李勇；聂贞蕴；揭克敏；詹以安；聂成；刘芬；丁成志；邵强；卿城；朱白鹭；钱克俭

来源：中华急诊医学杂志 2012 年 21卷 7期