目的 观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)表达埃兹蛋白-根蛋白-膜突蛋白(ezrin-radixin-moesin,ERM)及磷酸化ERM蛋白(p-ERM)的影响,并初步探讨Rho激酶(ROCK)与ERM蛋白磷酸化的关系.方法 体外培养大鼠PMVEC,随机(随机数字法)分为TNF-α量效组(0、0.1、1、10 μg/L TNF-α与PMVEC孵育60 min)、TNF-α时效组(10 μg/LTNF-α分别与PMVEC孵育0、15、30、60、90、120、180 min)和ROCK抑制剂(Y-27632)干预组:分别以10μg/L的TNF-α和30 μmol/L Y-27632+ 10 μg/LTNF-α与PMVEC孵育60min.Western印迹检测ERM蛋白及p-ERM相对表达量.采用SPSS 16.0软件进行分析,多组变量间比较采用单因素方差分析,以P< 0.05为差异具有统计学意义.结果 Western印迹检测到大鼠PMVEC均表达ERM蛋白和p-ERM,量效组p-ERM表达量随TNF-α浓度(0、0.1、1、10 μg/L)增加逐渐升高,分别为0.648±0.102、0.728±0.082、0.926±0.121、1.245±0.134(均P=0.000).时效组p-ERM相对表达量于15 min开始上升(0.777±0.151),90 min达高峰(1.295±0.176),之后渐下降,120 min (0.802±0.139),180 min仍维持较高水平(0.769±0.128),分别与未刺激0 min组(0.631±0.123)比较,P=0.004,0.000,0.001,0.016.ROCK抑制剂预处理PMVEC后再给
作者:赵妍;孙耕耘;尤青海
来源:中华急诊医学杂志 2015 年 24卷 6期