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[目的]研究细菌-过氧化氢酶-豌豆蚜Acyrthosiphon pisum三者之间的关系,探索过氧化氢酶在豌豆蚜免疫防御反应中的作用.[方法]用体外培养结合菌落计数的方法检测藤黄微球菌Micrococcus luteus和大肠杆菌Escherichia coli感染豌豆蚜后在蚜虫体内的增殖;分别用微孔板荧光检测和实时定量PCR的方法检测藤黄微球菌和大肠杆菌感染豌豆蚜之后,蚜虫体内H2O2水平和过氧化氢酶基因的转录水平;通过RNA干扰技术对豌豆蚜过氧化氢酶基因(Cat)进行沉默,并检测沉默后感染藤黄微球菌和大肠杆菌的豌豆蚜体内H2O2浓度和细菌数目以及豌豆蚜存活率.[结果]藤黄微球菌感染12 h后,豌豆蚜体内H2 O2水平以及过氧化氢酶基因表达水平显著升高;大肠杆菌感染12 h后,豌豆蚜过氧化氢酶基因表达水平上升,但H2O2水平无明显变化.沉默过氧化氢酶基因后,感染藤黄微球菌导致豌豆蚜体内H2O2含量在12 h显著上升,细菌数目在24 h约为对照组的一半,但对豌豆蚜存活率无影响;而过氧化氢酶基因沉默并未引起感染大肠杆菌的豌豆蚜体内H2O2水平、细菌数目以及豌豆蚜存活率发生明显变化.[结论]过氧化氢酶参与豌豆蚜对藤黄微球菌的防御过程,但不是该防御反应过程中的关键酶;而针对大肠杆菌感染,豌豆蚜可能通过其他途径来应对.

作者:陈金红;徐露;马力;吕志强

来源:昆虫学报 2017 年 60卷 10期

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作者:
陈金红;徐露;马力;吕志强
来源:
昆虫学报 2017 年 60卷 10期
标签:
豌豆蚜 细菌 活性氧 过氧化氢酶 RNA干扰 Acyrthosiphon pisum bacteria reactive oxygen species catalase RNA interference
[目的]研究细菌-过氧化氢酶-豌豆蚜Acyrthosiphon pisum三者之间的关系,探索过氧化氢酶在豌豆蚜免疫防御反应中的作用.[方法]用体外培养结合菌落计数的方法检测藤黄微球菌Micrococcus luteus和大肠杆菌Escherichia coli感染豌豆蚜后在蚜虫体内的增殖;分别用微孔板荧光检测和实时定量PCR的方法检测藤黄微球菌和大肠杆菌感染豌豆蚜之后,蚜虫体内H2O2水平和过氧化氢酶基因的转录水平;通过RNA干扰技术对豌豆蚜过氧化氢酶基因(Cat)进行沉默,并检测沉默后感染藤黄微球菌和大肠杆菌的豌豆蚜体内H2O2浓度和细菌数目以及豌豆蚜存活率.[结果]藤黄微球菌感染12 h后,豌豆蚜体内H2 O2水平以及过氧化氢酶基因表达水平显著升高;大肠杆菌感染12 h后,豌豆蚜过氧化氢酶基因表达水平上升,但H2O2水平无明显变化.沉默过氧化氢酶基因后,感染藤黄微球菌导致豌豆蚜体内H2O2含量在12 h显著上升,细菌数目在24 h约为对照组的一半,但对豌豆蚜存活率无影响;而过氧化氢酶基因沉默并未引起感染大肠杆菌的豌豆蚜体内H2O2水平、细菌数目以及豌豆蚜存活率发生明显变化.[结论]过氧化氢酶参与豌豆蚜对藤黄微球菌的防御过程,但不是该防御反应过程中的关键酶;而针对大肠杆菌感染,豌豆蚜可能通过其他途径来应对.