目的：探讨鼻咽癌(NPC)肿瘤干细胞对抗顺铂诱导氧化应激损伤的机制。方法利用CCK-8法测定顺铂对NPC细胞CNE-2与NPC肿瘤干细胞CNE-2S的半数抑制浓度。观察不同浓度(0.1、0.5、1.0μmol·L-1)顺铂作用后，细胞内活性氧（ROS）、总谷胱甘肽（GSH）的含量及总超氧化物歧化酶(SOD)的活性改变。实时定量RT-PCR测定1μmol·L-1顺铂作用于2组细胞48 h后，谷胱甘肽合成酶（GSS）、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚基（GCLC）、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶调节亚基（GCLM）、SOD1和SOD2 mRNA的表达情况，免疫印迹法检测SOD2蛋白的表达情况。利用小干扰RNA技术沉默SOD2，并与1μmol·L-1顺铂共处理2组细胞，用台盼蓝染色观察细胞的存活情况。结果顺铂对CNE-2S的半数抑制浓度显著高于CNE-2（μmol·L-1：9.8±1.1 vs 2.4±0.6， P＜0.05）。在不同浓度的顺铂处理后，2组细胞内ROS水平升高，但CNE-2S在处理前后的ROS水平均低于CNE-2（P<0.05）。1μmol·L-1顺铂刺激后，CNE-2S与CNE-2细胞中GSH含量均上升，但2组细胞间无明显差异（P>0.05）；2组细胞中SOD活性均上升，且CNE-2S显著高于CNE-2（P<0.05）。顺铂处理前后，2组细胞的GSS、GCLC、GCLM和SOD1的mRNA水平无明显差异，但CNE-2S中SOD2的mRNA及蛋白表达水平高于CNE-2（P
作者：林碧华；陈婧；郭春连；余海波；张鑫；周克元
来源：天津医药 2015 年 6期
