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[目的]克隆异色瓢虫Harmonia axyridis保护酶系中过氧化氢酶(Catalase,CAT)的全长cDNA序列,并分析该基因的基本特性.[方法]采用同源克隆和锚定PCR技术,从异色瓢虫中克隆到Harax CAT基因的cDNA全序列(GenBank登录号KC991026),并采用生物信息学的相关方法进行了分析.[结果]HaraxCAT的cDNA序列全长1781 bp,其包含110 bp的3'非编码区域和45 bp的5'非编码区域,可读框长1626 bp,编码541个氨基酸.预测该基因编码蛋白的分子量为61.55 ku,理论等电点为8.33,包含3个糖基化位点,无信号肽序列和跨膜结构.并且该基因包含了一个长达18个氨基酸的潜在的活性位点序列FDRERIPERVVHAKGAGA和血红素配体信号序列RIFSYGDTH.同源比对不同昆虫的CAT蛋白序列,发现昆虫CAT非常保守,Harax CAT与其他昆虫的同源性高达65%及以上,与赤拟谷盗Tribolium castaneum同源性最高,达75.25%;系统发育分析表明其与鞘翅目赤拟谷盗和白星金花龟Protaetia brevitarsis亲缘关系最近.[结论]获得异色瓢虫catalase基因的cDNA全长序列,证实昆虫CAT蛋白非常保守.

作者:唐斌;施佐堃;郭红双;王甦;王世贵;张帆

来源:应用昆虫学报 2014 年 51卷 1期

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作者:
唐斌;施佐堃;郭红双;王甦;王世贵;张帆
来源:
应用昆虫学报 2014 年 51卷 1期
标签:
异色瓢虫 过氧化氢酶 基因克隆 序列分析 Harmonia axyridis catalase gene cloning sequence analysis
[目的]克隆异色瓢虫Harmonia axyridis保护酶系中过氧化氢酶(Catalase,CAT)的全长cDNA序列,并分析该基因的基本特性.[方法]采用同源克隆和锚定PCR技术,从异色瓢虫中克隆到Harax CAT基因的cDNA全序列(GenBank登录号KC991026),并采用生物信息学的相关方法进行了分析.[结果]HaraxCAT的cDNA序列全长1781 bp,其包含110 bp的3'非编码区域和45 bp的5'非编码区域,可读框长1626 bp,编码541个氨基酸.预测该基因编码蛋白的分子量为61.55 ku,理论等电点为8.33,包含3个糖基化位点,无信号肽序列和跨膜结构.并且该基因包含了一个长达18个氨基酸的潜在的活性位点序列FDRERIPERVVHAKGAGA和血红素配体信号序列RIFSYGDTH.同源比对不同昆虫的CAT蛋白序列,发现昆虫CAT非常保守,Harax CAT与其他昆虫的同源性高达65%及以上,与赤拟谷盗Tribolium castaneum同源性最高,达75.25%;系统发育分析表明其与鞘翅目赤拟谷盗和白星金花龟Protaetia brevitarsis亲缘关系最近.[结论]获得异色瓢虫catalase基因的cDNA全长序列,证实昆虫CAT蛋白非常保守.