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目的:通过雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)/M2型丙酮酸激酶(M2 isoform pyruvate kinase,PKM2)轴探讨白藜芦醇对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞的糖酵解的影响.方法:培养CAL-27和SCC-15细胞,采用不同浓度白藜芦醇(0、50、100、200、400、800μmol/L)分别处理细胞24 h,噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测其对细胞增殖的影响并计算半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值.选用250μmol/L白藜芦醇或10 nmol/L mTOR抑制剂Rapamycin干预细胞24 h,采用2-脱氧葡萄糖类似物[(2-deoxy-2-[(7-nitro-2,1,3-benzoxadiazol-4-yl)amino]-D-glucose,2-NBDG]法检测细胞葡萄糖摄取率;比色法检测细胞上清中乳酸含量、细胞内糖酵解关键酶己糖激酶(hexokinase,HK)和丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)活性;Western blot检测细胞中己糖激酶2(hexokinase2,HK2)、PKM2、mTOR和磷酸化mTOR(phosphorylation mTOR,p-mTOR)等蛋白表达情况.结果:白藜芦醇对两株OSCC细胞的增殖有明显的抑制作用(P<0.05),并呈现浓度依赖性.白藜芦醇可显著抑制两株OSCC细胞的葡萄糖摄取能力以及降低乳酸的产生量(P<0.05),并可抑制两株细胞PK活性(P<0.05)、下调PKM2蛋白的表

作者:熊璟;何元春;刘杰;张英;李永强;邱勇棋;庄瑞

来源:口腔医学研究 2019 年 35卷 6期

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作者:
熊璟;何元春;刘杰;张英;李永强;邱勇棋;庄瑞
来源:
口腔医学研究 2019 年 35卷 6期
标签:
白藜芦醇 口腔鳞状细胞癌 糖酵解 雷帕霉素靶蛋白/M2 型丙酮酸激酶轴
目的:通过雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)/M2型丙酮酸激酶(M2 isoform pyruvate kinase,PKM2)轴探讨白藜芦醇对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞的糖酵解的影响.方法:培养CAL-27和SCC-15细胞,采用不同浓度白藜芦醇(0、50、100、200、400、800μmol/L)分别处理细胞24 h,噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测其对细胞增殖的影响并计算半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值.选用250μmol/L白藜芦醇或10 nmol/L mTOR抑制剂Rapamycin干预细胞24 h,采用2-脱氧葡萄糖类似物[(2-deoxy-2-[(7-nitro-2,1,3-benzoxadiazol-4-yl)amino]-D-glucose,2-NBDG]法检测细胞葡萄糖摄取率;比色法检测细胞上清中乳酸含量、细胞内糖酵解关键酶己糖激酶(hexokinase,HK)和丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)活性;Western blot检测细胞中己糖激酶2(hexokinase2,HK2)、PKM2、mTOR和磷酸化mTOR(phosphorylation mTOR,p-mTOR)等蛋白表达情况.结果:白藜芦醇对两株OSCC细胞的增殖有明显的抑制作用(P<0.05),并呈现浓度依赖性.白藜芦醇可显著抑制两株OSCC细胞的葡萄糖摄取能力以及降低乳酸的产生量(P<0.05),并可抑制两株细胞PK活性(P<0.05)、下调PKM2蛋白的表