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目的 研究白藜芦醇对人结直肠癌细胞(LoVo细胞)增殖和糖酵解的影响,并探讨其可能的分子机制.方法 体外培养LoVo细胞,采用MTT法检测不同浓度的白藜芦醇(0.0125、0.025、0.05、0.1、0.2 mmol/L)对LoVo细胞增殖能力的影响,筛选最适作用时间和半数抑制浓度(IC50).选用0.08 mmol/L的白藜芦醇和10 nmol/L mTOR抑制剂Rapamycin分别处理LoVo细胞48 h,采用平板隆形成实验观察细胞克隆形成能力;采用试剂盒检测细胞内葡萄糖、ATP和细胞上清中乳酸含量的变化;采用酶活性试剂盒检测糖酵解关键酶己糖激酶(HK)和丙酮酸激酶(PK)的活性;采用Western Blot检测细胞mTOR蛋白以及磷酸化的mTOR(p-mTOR)表达水平.结果 白藜芦醇能明显抑制LoVo细胞的增殖(P<0.05),并呈时间和剂量依赖性.与对照组比较,白藜芦醇干预可显著抑制LoVo细胞的克隆形成能力(P<0.05),并可显著减少细胞对葡萄糖的摄取能力,减少细胞乳酸和ATP生成量,降低糖酵解关键酶HK和PK的活性(P<0.05);同时,白藜芦醇可显著降低细胞内p-mTOR水平,并对mTOR蛋白表达无显著影响(P>0.05).另外,Rapa-mycin作用效果与白藜芦醇一致.结论 白藜芦醇可以抑制结直肠癌细胞的增殖和糖酵解作用,其作用机制可能与白藜芦醇调节mTOR信号通路有关.

作者:肖忠盛;龙泓;丁成明;肖友忠

来源:实用医学杂志 2019 年 35卷 14期

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作者:
肖忠盛;龙泓;丁成明;肖友忠
来源:
实用医学杂志 2019 年 35卷 14期
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白藜芦醇 增殖 糖酵解 mTOR信号通路
目的 研究白藜芦醇对人结直肠癌细胞(LoVo细胞)增殖和糖酵解的影响,并探讨其可能的分子机制.方法 体外培养LoVo细胞,采用MTT法检测不同浓度的白藜芦醇(0.0125、0.025、0.05、0.1、0.2 mmol/L)对LoVo细胞增殖能力的影响,筛选最适作用时间和半数抑制浓度(IC50).选用0.08 mmol/L的白藜芦醇和10 nmol/L mTOR抑制剂Rapamycin分别处理LoVo细胞48 h,采用平板隆形成实验观察细胞克隆形成能力;采用试剂盒检测细胞内葡萄糖、ATP和细胞上清中乳酸含量的变化;采用酶活性试剂盒检测糖酵解关键酶己糖激酶(HK)和丙酮酸激酶(PK)的活性;采用Western Blot检测细胞mTOR蛋白以及磷酸化的mTOR(p-mTOR)表达水平.结果 白藜芦醇能明显抑制LoVo细胞的增殖(P<0.05),并呈时间和剂量依赖性.与对照组比较,白藜芦醇干预可显著抑制LoVo细胞的克隆形成能力(P<0.05),并可显著减少细胞对葡萄糖的摄取能力,减少细胞乳酸和ATP生成量,降低糖酵解关键酶HK和PK的活性(P<0.05);同时,白藜芦醇可显著降低细胞内p-mTOR水平,并对mTOR蛋白表达无显著影响(P>0.05).另外,Rapa-mycin作用效果与白藜芦醇一致.结论 白藜芦醇可以抑制结直肠癌细胞的增殖和糖酵解作用,其作用机制可能与白藜芦醇调节mTOR信号通路有关.