目的 了解NKX2-5基因在细胞中的沉默表达模式.方法 构建NKX2-5基因沉默体外表达载体,将载体转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC株),利用Western blotting和定量聚合酶链反应技术分析NKX2-5体外表达载体在细胞中的转录水平.结果 慢病毒载体在5 μg/mL Polybrene条件下阳性细胞比例基本达到高峰,转染效率可达80%以上.Western blotting结果显示实验组PLVE2641表达量低于对照组PLVT7.定量聚合酶链反应结果显示实验组PLVE2641靶基因NKX2-5受到沉默,mRNA表达量显著下降,抑制率>72%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建NKX2-5基因体外沉默模型,为进一步研究先天性心脏病形成奠定实验基础,为基因治疗提供理论依据.
作者:张帆;宗渊;厍广岩;钟浩;武建英
来源:兰州大学学报(医学版) 2022 年 48卷 2期