目的:通过HIF-1α反义寡核苷酸转染hep-2细胞株,观察细胞凋亡及对放疗的反应情况.方法:体外培养人喉鳞状细胞癌hep-2细胞株,脂质体介导反义寡核苷酸转染,6 h后4 Gy γ射线照射.低氧培养24 h后RT-PCR检测HIF-1α mRNA表达,流式细胞仪检测HIF-1α蛋白水平及细胞凋亡率,MTT检测细胞存活情况.结果:低氧使人喉鳞状细胞癌hep-2细胞株对放射的敏感性下降;低氧并未影响HIF-1α mRNA的表达,HIF-1α蛋白在低氧6 h时表达已开始升高,低氧36 h时达高峰,之后表达逐渐下降;放射刺激对HIF-1α蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);各浓度的反义寡核苷酸转染组降低HIF-1α的转录及蛋白水平;MTT结果显示随反义核苷酸浓度增高,其增殖抑制效应越强(P<0.05),正义对照核苷酸及脂质体对照没有显著的抑制效应(P>0.05),但转染浓度在400 nmol/L以上时,正义对照也表现出一定的增殖抑制作用(P<0.05);放疗后反义寡核苷酸转染组蛋白表达下降明显,较对照组及单纯放射组细胞凋亡率增加(P<0.01).结论:低氧环境下人喉鳞状细胞癌hep-2细胞株对放射有抵抗作用,这种抵抗作用与低氧时HIF-1α蛋白表达上调有关,而放射本身并未上调HIF-1α蛋白的表达;HIF-1α反义寡核苷酸转染hep-2细胞株能够降低HIF-1α蛋白表达,提高低氧环境下人喉鳞状细胞癌he
作者:刘春玲;李晓明;路秀英;张立坤
来源:临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2007 年 21卷 13期