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目的 探讨千金藤素对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的埃克替尼耐药性的影响及可能的作用机制.方法 采用埃克替尼(Icotinib)浓度递增的方式诱导人NSCLC PC-9细胞耐药建立埃克替尼耐药细胞PC-9/Icotinib resistance(IR).MTT法筛选千金藤素的实验浓度,并检测千金藤素对PC-9/IR细胞埃克替尼敏感性的影响;取对数生长期PC-9/IR耐药细胞,分为PC-9/IR组(PC-9/IR细胞)、千金藤素组(PC-9/IR细胞+8μmol/L千金藤素)、埃克替尼组(PC-9/IR细胞+20μmol/L埃克替尼)、千金藤素+埃克替尼组(PC-9/IR细胞+20μmol/L埃克替尼+8μmol/L千金藤素)、3-MA组(PC-9/IR细胞+5 mmol/L的3-MA+20μmol/L埃克替尼+8μmol/L千金藤素)、PFT-α组(PC-9/IR细胞+40μmol/L的p53抑制剂Pifithrin-α+20μmol/L埃克替尼+8μmol/L千金藤素),流式细胞术检测细胞凋亡;MDC染色检测细胞自噬;透射电镜观察细胞超微结构变化;Western blot检测自噬相关蛋白表达[p53、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其磷酸化蛋白(p-mTOR)、自噬相关蛋白Beclin-1、微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ(LC3-Ⅰ)].结果 千金藤素能增加PC-9/IR细胞的埃克替尼敏感性,与PC-9/IR组相比,单用千金藤素和埃克替尼对PC-9/IR细胞的凋亡、自噬无显著影响(P>0.05);与千金藤素组、埃

作者:刘然;邢爽;王璐;张怡;许保海

来源:临床肺科杂志 2022 年 27卷 5期

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作者:
刘然;邢爽;王璐;张怡;许保海
来源:
临床肺科杂志 2022 年 27卷 5期
标签:
非小细胞肺癌;千金藤素;自噬;p53;埃克替尼耐药
目的 探讨千金藤素对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的埃克替尼耐药性的影响及可能的作用机制.方法 采用埃克替尼(Icotinib)浓度递增的方式诱导人NSCLC PC-9细胞耐药建立埃克替尼耐药细胞PC-9/Icotinib resistance(IR).MTT法筛选千金藤素的实验浓度,并检测千金藤素对PC-9/IR细胞埃克替尼敏感性的影响;取对数生长期PC-9/IR耐药细胞,分为PC-9/IR组(PC-9/IR细胞)、千金藤素组(PC-9/IR细胞+8μmol/L千金藤素)、埃克替尼组(PC-9/IR细胞+20μmol/L埃克替尼)、千金藤素+埃克替尼组(PC-9/IR细胞+20μmol/L埃克替尼+8μmol/L千金藤素)、3-MA组(PC-9/IR细胞+5 mmol/L的3-MA+20μmol/L埃克替尼+8μmol/L千金藤素)、PFT-α组(PC-9/IR细胞+40μmol/L的p53抑制剂Pifithrin-α+20μmol/L埃克替尼+8μmol/L千金藤素),流式细胞术检测细胞凋亡;MDC染色检测细胞自噬;透射电镜观察细胞超微结构变化;Western blot检测自噬相关蛋白表达[p53、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其磷酸化蛋白(p-mTOR)、自噬相关蛋白Beclin-1、微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ(LC3-Ⅰ)].结果 千金藤素能增加PC-9/IR细胞的埃克替尼敏感性,与PC-9/IR组相比,单用千金藤素和埃克替尼对PC-9/IR细胞的凋亡、自噬无显著影响(P>0.05);与千金藤素组、埃