目的 构建含丙型肝炎病毒(HCV)复合多表位基因的真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染细胞系.方法 通过生物信息学预测分析的方法得到涵盖HCV不同基因型与小鼠H2复合体的多个细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位,串联后人工合成基因序列,将其克隆入真核表达载体pEGFP-N3中,然后利用脂质体法转染CHO细胞,通过持续G418筛选建立稳定转染细胞株.最后通过荧光显微镜观察、RT-PCR和Western Blot等方法证实多表位基因的表达.结果 所构建的含有HCV复合多表位基因的真核表达载体pEGFP-mEpi在CHO细胞中能稳定表达.结论 真核表达载体的成功构建和稳定转染CHO细胞系的建立为进一步研究复合多表位疫苗的基因免疫奠定了基础.
作者：吕欣；尹文；孙梦宁；黄小军；杨敬；姚敏；薛小平；贾战生；徐志凯
来源：临床肝胆病杂志 2011 年 27卷 1期
