目的 研究化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)反复作用肝癌细胞株PLC/RAF/5后生物学特性的变化,探讨耐药肝癌细胞与肝癌干细胞之间的相关性.方法 用低浓度的5-Fu(1μg/ml)反复多次作用于人肝癌细胞株PLC/RAF/5后建立PLC/RAF/5/5-Fu细胞株,观察两种细胞的形态学差异.用CCK-8法检测不同浓度的5-Fu(0、0.25、0.5、1、1.5、2μg/rnl)对两种细胞增殖的抑制作用;在不同浓度的5-Fu(0.5、1、2μg/ml)作用48 h后,流式细胞仪分析不同浓度下两种细胞的凋亡情况;检测两种细胞中侧群细胞的比例;平板克隆集落实验比较两种细胞的克隆形成能力;Western Blot检测两种细胞中Bax、Bcl-2、ABCG2和FoxM1蛋白的表达情况.计量资料组间比较采用t检验.结果 用化疗药物5-Fu成功建立PLC/RAF/5/5-Fu细胞株.PLC/RAF/5/5-Fu细胞比PLC/RAF/5细胞体积大,突起减少,呈长梭形改变,折光性增强.与亲本细胞相比,PLC/RAF/5/5-Fu细胞对5-Fu增殖抑制作用的敏感性降低,细胞周期GO/G1期比例降低,而S期和G2/M期比例上升;抗凋亡能力增加;侧群细胞比例增加;增殖能力增强,上述差异均具有统计学意义(P值均＜0.05).Western Blot检测表明PLC/RAF/5/5-Fu细胞Bcl-2、FoxM1、ABCG2蛋白表达增强,而PLC/RAF/5细胞的Bax蛋白表达增强,差异具有统计学意义(P值均＜0.01).结论

作者：程康文；李琪；詹勇强；王成友；王贵和；倪勇；朱宝和；邓雪松

来源：临床肝胆病杂志 2015 年 31卷 9期