目的 探讨HBV X蛋白(HBx)对抑癌基因p16的表达、p16启动子甲基化的影响,从表观遗传学的角度探讨HBx参与HBV相关性HCC发生发展的相关机制.方法 以人肝母细胞瘤细胞HepG2、表达绿色荧光蛋白(GFP)的HepG2/GFP、稳定表达HBx蛋白的HepG2/GFP-HBx细胞为实验系统;采用Western Blot法检测HepG2、HepG2/GFP、HepG2/GFP-HBx细胞中p16蛋白的表达水平.以DNA甲基转移酶(DNMT)抑制剂5-氮杂-2'脱氧胞苷(5-Aza-2 '-DC)处理HepG2/GFP-HBx细胞,采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测HepG2、HepG2/GFP细胞及药物处理和未处理的HepG2/GFP-HBx细胞中抑癌基因p16启动子区域的甲基化情况.计量资料多组间比较采用单因素方差分析.结果 Western Blot分析示HepG2/GFP-HBx细胞中p16蛋白相对灰度值(23.68 ±3.93)显著低于HepG2(91.23±6.87)、HepG2/GFP(94.55±8.40)细胞,差异均有统计学意义(P值分别为0.0007、0.0014),HepG2/GFP与HepG2细胞中p16蛋白相对灰度值差异无统计学意义(P＞0.05);MSP法检测示HepG2/GFP-HBx细胞中存在p16基因启动子区域部分CpG位点甲基化,HepG2、HepG2/GFP细胞中未检出其甲基化,DNMT抑制剂5-Aza-2'-DC处理的HepG2/GFP-HBx细胞却能恢复p16基因启动子区域的未甲基化状态.结论 在肝癌细胞系中,HBx通过诱导抑癌基因p16启

作者：康艳红；李威；占伟丽；尚佳；杨林

来源：临床肝胆病杂志 2016 年 32卷 3期