目的:观察氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡中前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)与炎症因子表达的关系。方法用 ox-LDL 处理 HUVECs 0小时、12小时、24小时、36小时、48小时,分别检测 PCSK9、白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、C 反应蛋白(CRP)mRNA 和蛋白的表达以及核因子-κB (NF-κB)核位移。Lipofectamine 2000转染 PCSK9小分子干扰 RNA (PCSK9 siRNA)进入 HUVECs 6小时后,加入 ox-LDL 处理24小时,分别检测 PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP 的表达以及 NF-κB 核位移。结果随着 ox-LDL 处理时间的增加,PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP mRNA 的表达上调、NF-κB 的核位移明显增加,以24小时表达(核位移)最明显,随后表达(核位移)逐渐减少(P <0.05);细胞培养上清液中 IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP 蛋白的浓度随着时间的推移逐渐增加,48小时达到峰值,与0小时比较,48小时增加最明显(P <0.01)。siRNA 组 PCSK9、IL-6、MCP-1、MMP-9、CRP mRNA 和蛋白的表达以及 NF-κB 核位移较阴性转染组明显降低(P <0.01)。结论 PCSK9 siRNA 能够抑制 ox-LDL 诱导的 HUVECs 炎症因子的表达,PCSK9可能参与了炎症反应的调节。
作者:钱正瑶;李广平;李娇;梁雪;徐昭;陈艳;赵辉
来源:临床荟萃 2016 年 31卷 4期