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目的 探究黄芩素对过氧化氢(H2O2)诱导肾小管上皮细胞活性、凋亡的影响及其机制.方法 将体外培养的肾小管上皮NRK52E细胞株随机分为5组,对照组为正常培养,H2 O2组为500 μmol/L H2O2干预细胞24h,H2 O2组+黄芩素(50 μmol/L)、H2 O2组+黄芩素(100 μmol/L)、H2 O2组+黄芩素(200 μmoL/L)为加入不同浓度黄芩素和500μmol/L H2O2处理细胞;四甲基偶氮唑(MTT)检测细胞的活性,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞的凋亡率,蛋白质印迹法(Western Blot)检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、活化的Caspase-3(Cleaved Caspase-3),试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA).结果 H2O2诱导NRK52E细胞活性降低(P<0.05)、凋亡率增加(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05),MDA活性增加(P<0.05),Cleaved Caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05);与H2O2组相比,不同浓度黄芩素提高NRK52E细胞的活性(P<0.05),降低凋亡率(P<0.05),提高SOD活性(P<0.05),降低MDA活性和Cleaved Caspase-3蛋白水平(P<0.05).结论 黄芩素可抑制肾上腺上皮细胞氧化应激反应,并通过下调磷酸化Caspase-3蛋白水平,从而抑制细胞凋亡,减轻细胞损伤.

作者:郭亚菊;张勇军;宋书贤;张琼

来源:临床和实验医学杂志 2018 年 17卷 19期

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作者:
郭亚菊;张勇军;宋书贤;张琼
来源:
临床和实验医学杂志 2018 年 17卷 19期
标签:
肾小管上皮细胞 黄芩素 氧化应激 凋亡 含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3
目的 探究黄芩素对过氧化氢(H2O2)诱导肾小管上皮细胞活性、凋亡的影响及其机制.方法 将体外培养的肾小管上皮NRK52E细胞株随机分为5组,对照组为正常培养,H2 O2组为500 μmol/L H2O2干预细胞24h,H2 O2组+黄芩素(50 μmol/L)、H2 O2组+黄芩素(100 μmol/L)、H2 O2组+黄芩素(200 μmoL/L)为加入不同浓度黄芩素和500μmol/L H2O2处理细胞;四甲基偶氮唑(MTT)检测细胞的活性,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞的凋亡率,蛋白质印迹法(Western Blot)检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、活化的Caspase-3(Cleaved Caspase-3),试剂盒检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA).结果 H2O2诱导NRK52E细胞活性降低(P<0.05)、凋亡率增加(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05),MDA活性增加(P<0.05),Cleaved Caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05);与H2O2组相比,不同浓度黄芩素提高NRK52E细胞的活性(P<0.05),降低凋亡率(P<0.05),提高SOD活性(P<0.05),降低MDA活性和Cleaved Caspase-3蛋白水平(P<0.05).结论 黄芩素可抑制肾上腺上皮细胞氧化应激反应,并通过下调磷酸化Caspase-3蛋白水平,从而抑制细胞凋亡,减轻细胞损伤.