目的构建含人血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)反义cDNA(ahAT1)的腺病毒穿梭质粒,观察其在血管平滑肌细胞(VSMC)中的表达,为ahAT1抗高血压、PTCA术后再狭窄及肺动脉高压的研究奠定基础.方法用定向克隆法将人AT1R cDNA反向插入到穿梭质粒pACCMVPLPA的CMV启动子之下,即获得重组腺病毒穿梭质粒pAd/CMV.ahAT1.以脂质体包裹质粒并转染VSMC,用免疫细胞化学方法和图像分析鉴定此质粒对VSMC表达AT1R的影响.结果 AT1R cDNA成功地反向插入到pACCMVPLPA载体,与对照组相比,pAd/CMV.ahAT1明显抑制了VSMC的AT1R表达(P<0.05).结论成功构建了携带反义人AT1R cDNA的腺病毒穿梭质粒,并在血管平滑肌细胞中得到了有效表达.
作者:涂明利;王汉琴;涂远超;王家宁;黄永章;王卫民;杨桂元
来源:临床检验杂志 2003 年 21卷 4期