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目的 对维生素K2(Vit K2)诱导慢性粒细胞白血病(CML)急变细胞株K562细胞凋亡进行检测.方法 取对数生长期细胞(1×108/L),对照组不加药,实验组分别加入不同浓度(5、10、20和40μmol/L)Vit K2后24、48、72和96 h收集细胞,采用透射电镜技术、流式细胞术、RT-PCR以及化学发光比色法等多参数分析细胞凋亡及其机制.结果 Vit K2作用K562细胞72 h后,电镜下可见典型的凋亡细胞的形态改变;流式细胞仪分析结果显示随着Vit K2浓度的增加和作用时间的延长,凋亡率逐渐增高并呈明显的浓度、时间依赖性;S期细胞逐渐减少,G0/G1期细胞逐渐增多,细胞被阻滞在G0/G1期.随着Vit K2浓度的增高抗凋亡基因bcl-2、survivin表达明显下调,而促凋亡基因bax表达无明显差异,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的活性逐渐增强.结论 Vit K2可能是通过激活caspase-3途径诱导K562细胞发生凋亡,同时抗凋亡基因survivin、bcl-2也参与了凋亡调控过程.

作者:邵泽叶;陈宝安;夏国华;朱怀刚;何增;张明辉

来源:临床检验杂志 2006 年 24卷 6期

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作者:
邵泽叶;陈宝安;夏国华;朱怀刚;何增;张明辉
来源:
临床检验杂志 2006 年 24卷 6期
标签:
白血病 凋亡 细胞周期 基因表达 维生素K2 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
目的 对维生素K2(Vit K2)诱导慢性粒细胞白血病(CML)急变细胞株K562细胞凋亡进行检测.方法 取对数生长期细胞(1×108/L),对照组不加药,实验组分别加入不同浓度(5、10、20和40μmol/L)Vit K2后24、48、72和96 h收集细胞,采用透射电镜技术、流式细胞术、RT-PCR以及化学发光比色法等多参数分析细胞凋亡及其机制.结果 Vit K2作用K562细胞72 h后,电镜下可见典型的凋亡细胞的形态改变;流式细胞仪分析结果显示随着Vit K2浓度的增加和作用时间的延长,凋亡率逐渐增高并呈明显的浓度、时间依赖性;S期细胞逐渐减少,G0/G1期细胞逐渐增多,细胞被阻滞在G0/G1期.随着Vit K2浓度的增高抗凋亡基因bcl-2、survivin表达明显下调,而促凋亡基因bax表达无明显差异,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的活性逐渐增强.结论 Vit K2可能是通过激活caspase-3途径诱导K562细胞发生凋亡,同时抗凋亡基因survivin、bcl-2也参与了凋亡调控过程.