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目的 探讨人脐带间质干细胞来源的exosomes (hucMSC-Ex)对四氯化碳(CCL4)诱导的肝细胞氧化应激损伤的保护作用.方法 将体外培养的人肝细胞系HL7702分为对照组(常规培养)、CCL4损伤组及hucMSC-Ex处理组(CCL4+ hucMSC-Ex).免疫荧光检测CM-Dil染料标记的hucMSC-Ex进入HL7702细胞的情况;免疫组织化学法分析细胞过氧化物8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHdG)的表达水平;比色法检测培养上清中谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量;western blot分析P38MAPK通路的活化情况.结果 免疫荧光结果显示,hucMSC-Ex可转移进入HL7702细胞;比色法结果表明,与对照组相比,CCL4损伤组HL7702细胞培养上清中GSH含量下降,MDA上升(P<0.01),hucMSC-Ex处理组GSH和MDA含量无显著性变化;免疫组化结果显示,与对照组相比,CCL4损伤组8-OHdG表达阳性的HL7702细胞(胞核棕黄色)数量明显增高,而hucMSC-Ex处理组阳性细胞数量无明显变化;western blot结果表明,CCL4损伤组P-P38蛋白表达水平明显上升,而hucMSC-Ex处理组P-P38蛋白表达下降,其P-P38与P38/GAPDH蛋白的灰度值较CCL4损伤组下降约2.4倍.结论 HucMSC-Ex可减轻CCL4诱导的肝细胞过氧化损伤.

作者:王冰莹;肖宇晴;蒋留留;李里明;李霞;贾浩源;周颖;叶惠慧;许文荣

来源:临床检验杂志 2013 年 31卷 6期

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作者:
王冰莹;肖宇晴;蒋留留;李里明;李霞;贾浩源;周颖;叶惠慧;许文荣
来源:
临床检验杂志 2013 年 31卷 6期
标签:
脐带间质干细胞 外体 四氯化碳 肝损伤 氧化应激 human umbilical cord mesenchymal stem cell exosome carbon tetrachloride hepatic injury oxidative stress
目的 探讨人脐带间质干细胞来源的exosomes (hucMSC-Ex)对四氯化碳(CCL4)诱导的肝细胞氧化应激损伤的保护作用.方法 将体外培养的人肝细胞系HL7702分为对照组(常规培养)、CCL4损伤组及hucMSC-Ex处理组(CCL4+ hucMSC-Ex).免疫荧光检测CM-Dil染料标记的hucMSC-Ex进入HL7702细胞的情况;免疫组织化学法分析细胞过氧化物8-羟基脱氧鸟嘌呤(8-OHdG)的表达水平;比色法检测培养上清中谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量;western blot分析P38MAPK通路的活化情况.结果 免疫荧光结果显示,hucMSC-Ex可转移进入HL7702细胞;比色法结果表明,与对照组相比,CCL4损伤组HL7702细胞培养上清中GSH含量下降,MDA上升(P<0.01),hucMSC-Ex处理组GSH和MDA含量无显著性变化;免疫组化结果显示,与对照组相比,CCL4损伤组8-OHdG表达阳性的HL7702细胞(胞核棕黄色)数量明显增高,而hucMSC-Ex处理组阳性细胞数量无明显变化;western blot结果表明,CCL4损伤组P-P38蛋白表达水平明显上升,而hucMSC-Ex处理组P-P38蛋白表达下降,其P-P38与P38/GAPDH蛋白的灰度值较CCL4损伤组下降约2.4倍.结论 HucMSC-Ex可减轻CCL4诱导的肝细胞过氧化损伤.