【目的】观察银杏叶提取物EGb761对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)损伤的干预作用。【方法】取原代培养的hUC-MSCs,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,确定建立氧化应激损伤细胞模型所需的t-BHP浓度以及EGb761的最适作用浓度;采用Annexin V异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(FITC/PI)双染流式细胞术测定100 mg/L EGb761对100μmol/L t-BHP所致hUC-MSCs凋亡的影响,同时检测脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化,并采用实时荧光定量PCR观察p53和p21Cip1/Waf1表达水平的改变。【结果】用10~200 mg/L的EGb761预处理3 h可降低hUC-MSCs对100μmol/L t-BHP所致细胞增殖抑制的敏感性,浓度超过100 mg/L后EGb761对hUC-MSCs的保护效果无明显提高;100 mg/L EGb761可显著抑制100μmol/L t-BHP作用6 h后对hUC-MSCs凋亡及其胞内MDA的诱导作用,保持hUC-MSCs内的SOD活性,并显著降低t-BHP损伤的hUC-MSCs内p53和p21Cip1/Waf1的表达。【结论】 EGb761具有保护被氧化应激损伤的hUC-MSCs的作用,其机制可能与p53/p21信号通路的下调有关。
作者:袁茵;王辉;鲁欣
来源:广州中医药大学学报 2015 年 3期