目的 用RNA干扰(RNAi)技术抑制CD147基因的表达,检测其对人结直肠癌细胞系HT29细胞增殖、侵袭和致瘤能力的影响.方法 设计合成CD147特异性的RNA干扰表达质粒pYr-mir30-shRNA,稳定转染HT29细胞,分别获得HT29/shR-NA-control和HT29/shRNA细胞;RT-PCR和western blot分别检测CD147、MCT1、MCT4 mRNA和蛋白质的表达;明胶酶谱法检测MMP-2和MMP-9的活性;CCK8法分析细胞的增殖能力;Transwell小室检测细胞的侵袭能力;观察结直肠癌裸鼠皮下移植瘤的致瘤能力.结果 与空白组比较,RNA干扰后的细胞中CD147、MCT1 mRNA(F分别为99.645和84.985)及蛋白质(F分别为73.675和19.842)的表达水平均降低(P均＜0.01);MMP-2和MMP-9的活性均降低(P均＜0.01);细胞增殖(t分别为7.491、15.023、14.584、6.637和11.211,P均＜0.01)和侵袭(F=330.443,P＜0.01)能力均降低,使裸鼠荷瘤能力下降(F=365.679,P＜0.01).结论 RNA干扰能有效抑制CD147基因的表达,抑制HT29细胞的增殖和侵袭能力.
作者：李瑞；许晔琼；潘玉琴；何帮顺；高天翼；孙慧玲；邓齐文；王书奎
来源：临床检验杂志 2014 年 32卷 1期
