目的 建立基于PCR反向斑点杂交技术(PCR-RDB)的32型生殖道人乳头瘤病毒(HPV)基因分型方法.方法 设计并合成基于MY09/11的HPV型特异性引物和探针;以HPV载体和临床样本为模板,用自建的PCR-RDB法对300例临床宫颈脱落细胞进行HPV分型检测,并与商品化的PCR-RDB法检测结果进行比较.结果 自建的PCR-RDB法的特异性、准确性和重复性良好,其对39和51型HPV的最低检测限为50拷贝/反应,其余各型别HPV最低检测限为5拷贝/反应.用自建的PCR-RDB法对300例临床样本进行HPV分型的总阳性率、单一感染率和多重感染率分别为18.67% (56/300)、12.33% (37/300)、6.33% (19/300),与商品化试剂的检测结果均无统计学意义(x2分别为0.744,0.597和0.118,P均>0.05).两法一致性检验的Kappa值为0.889(P<0.01).结论 成功建立了灵敏度、特异性高,重复性良好,适合临床上对32型HPV分型的PCR-RDB法.
作者:黄学文;赵琪;赵兰静;朱菊平;吴玉梅;潘杰
来源:临床检验杂志 2015 年 33卷 9期