目的 采用基因工程技术构建风疹病毒复合多表位肽,探讨其对风疹病毒感染的血清学诊断价值.方法 根据风疹病毒主要抗原分子E1、E2,设计并构建风疹病毒复合多表位肽的重组表达载体,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在大肠埃希菌Rosetta中进行诱导表达,并用Ni2+螯合柱亲和纯化获得复合多表位肽;经western blot鉴定其对风疹病毒感染后的IgM阳性血清的免疫反应性;建立基于风疹病毒复合多表位肽的IgM-ELISA检测方法,用于风疹病毒感染患者中血清IgM抗体的检测.结果 成功构建风疹病毒复合多表位肽,在大肠埃希菌Rosetta中获得了高效表达;纯化后的风疹病毒复合多表位肽经western blot分析显示,复合多表位肽对风疹病毒IgM阳性血清具有较好的免疫反应性;IgM-ELISA法检测结果表明,重组的复合多表位肽能够检测出风疹病毒感染后IgM阳性血清,与IgM阴性血清不发生反应.结论 制备的风疹病毒复合多表位肽具有良好的抗原性,可用于风疹病毒感染患者IgM抗体的检测,提高风疹病毒感染的诊断效能.
作者:缪卫华;渠利利;庞露;李智洋;司进
来源:临床检验杂志 2015 年 33卷 12期