目的 探讨诱导人脐血间充质干细胞(hUCB-MSCs)向神经样细胞分化的最优条件.方法 采用密度梯度离心法获得MSCs;流式细胞术分析hUCB-MSCs CD34、CD29、CD44等免疫表型;用5种不同诱导因子进行诱导:(1)表皮生长因子(EGF)+碱性成纤维细胞生长因子(bFGF);(2)维甲酸(RA)+ EGF+ bFGF;(3)RA+脑源性神经营养因子(BDNF) +bFGF;(4)丹参素+EGF+ bFGF;(5)β-巯基乙醇(β-ME)+二甲基亚砜(DMSO)+丁羟基茴香醚(BHA);并用免疫荧光法检测诱导前后hUCB-MSCs神经元核抗原(NeuN)、β-微管蛋白-Ⅲ(β-Tubulin-Ⅲ)和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达水平.结果 hUCB-MSCs中CD29[(96.2±3.2)%]、CD44[(97.1±2.4)%]呈强阳性,CD34呈弱阳性[(4.1±2.1)%].hUCB-MSCs经5种方法诱导后均表现出类似神经元样细胞的形态改变.免疫荧光化学法结果显示,诱导后的细胞高表达NeuN和β-Tubulin-Ⅲ,低表达GFAP.EGF+ bFGF诱导组NeuN、β-Tubulin-Ⅲ阳性细胞[(42.7±3.1)%,(55.4±2.2)%]在5个诱导组中表达最低(P<0.05);丹参素+EGF +bFGF诱导组(78.9±4.4%,79.6±3.3%)表达水平最高(P<0.05).结论 hUCB-MSCs经不同诱导条件均能够向神经元和神经胶质细胞分化,丹参素+ EGF+ bFGF诱导法诱导效果最好.
作者:陈瑶;张馨月;陆玉霞;徐文慧;徐廷云;褚静英
来源:临床检验杂志 2016 年 34卷 9期