目的:探讨神经节甘脂(gangliosides,GM-1)预处理对布比卡因诱导的 N2a 神经细胞凋亡后 caspase-3表达的影响。方法采用小鼠神经母细胞瘤细胞 N2a 细胞,进行实验一:将对数生长期 N2a 细胞随机分为:对照组(C 组),N2a 细胞不进行任何干预;布比卡因组,N2a 神经细胞与不同浓度布比卡因600μmol/L(B1组)、900μmol/L(B2组)、1200μmol/L(B3组)、1500μmol/L(B4组)、2000μmol/L(B5组)分别培养6、12、24和36 h,以 CCK-8法评价 N2a 神经细胞存活率,每组实验重复3次,观察布比卡因对 N2a 神经细胞最低有效损伤浓度和时间,结束后行实验二。实验二:将N2a 神经细胞分为:对照组(A 组),无布比卡因损伤及 GM-1预处理;布比卡因组(B 组),在布比卡因最低有效损伤浓度和时间前24 h,不进行 GM-1预处理;不同浓度的 GM-1预保护组,在布比卡因最低有效损伤浓度和时间前24 h,培养液加入不同浓度 GM-10.1μmol/L(BG1组)、1.0μmol/L(BG2组)、10μmol/L(BG3组)进行预处理,以 CCK-8法评价 N2a 细胞存活率,每组实验重复3次。以Western Blot 法检测损伤细胞 caspase-3的表达,每组实验重复3次,并进行 N2a 神经细胞形态学观察。结果实验一:选择布比卡因诱导致 N2a 神经细胞损伤的最低有效浓度900μmol/L 和培养时间为12 h。实验二
作者:梁予洁;吉杰梅;刘敬臣
来源:临床麻醉学杂志 2016 年 32卷 7期