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目的:评价转化生长因子β激活激酶1(TGFβ-activated kinase-1,TAK1)介导的细胞自噬在小鼠脑缺血-再灌注(ischemia-reperfusion,IR)损伤中的作用。方法雄性昆明小鼠72只,8周龄,体重(25.0±3.5)g,采用随机数字表法分为六组:空白对照组(C 组)、假手术组(S 组)、IR 组、TAK1短发夹 RNA(shRNA)慢病毒组(T 组)、阴性对照慢病毒组(Y 组)和生理盐水组(NS 组),每组12只。T 组、Y 组和 NS 组分别以1μl/min 侧脑室注射 TAK1 shRNA 慢病毒、阴性对照慢病毒和等量生理盐水10μl。2周后 IR 组、T 组、Y 组和 NS 组制备脑 IR 损伤模型,缺血2 h 后恢复灌注;S 组分离颈总动脉但不夹闭,其余手术步骤同 IR 组。再灌注24 h 后进行神经功能缺陷评分(neuro-logical severity scores,NSS);NSS 评分完成后处死小鼠,取脑组织测定脑梗死体积;Western blot 法检测小鼠脑组织 TAK1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1和 p62蛋白含量。结果 IR 组、T 组、Y 组和 NS 组NSS 评分和脑梗死体积百分比明显高于 C 组(P <0.05);T 组 NSS 评分和脑梗死体积百分比明显低于 IR 组(P <0.05)。IR 组、Y 组和 NS 组脑组织 TAK1蛋白含量明显高于 C 组(P <0.05);T 组脑组织 TAK1蛋白含量明显低于 IR 组(P <0.05)。IR 组、T 组、Y 组和 NS 组 LC3Ⅱ/LC3Ⅰ

作者:谢凡;樊友凌;杨明明;聂颖;周俊

来源:临床麻醉学杂志 2017 年 33卷 2期

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作者:
谢凡;樊友凌;杨明明;聂颖;周俊
来源:
临床麻醉学杂志 2017 年 33卷 2期
标签:
转化生长因子β激活激酶 1 自噬 缺血-再灌注损伤 脑 TGFβ-activated kinase-1 Autophagy Ischemic-reperfusion injury Brain
目的:评价转化生长因子β激活激酶1(TGFβ-activated kinase-1,TAK1)介导的细胞自噬在小鼠脑缺血-再灌注(ischemia-reperfusion,IR)损伤中的作用。方法雄性昆明小鼠72只,8周龄,体重(25.0±3.5)g,采用随机数字表法分为六组:空白对照组(C 组)、假手术组(S 组)、IR 组、TAK1短发夹 RNA(shRNA)慢病毒组(T 组)、阴性对照慢病毒组(Y 组)和生理盐水组(NS 组),每组12只。T 组、Y 组和 NS 组分别以1μl/min 侧脑室注射 TAK1 shRNA 慢病毒、阴性对照慢病毒和等量生理盐水10μl。2周后 IR 组、T 组、Y 组和 NS 组制备脑 IR 损伤模型,缺血2 h 后恢复灌注;S 组分离颈总动脉但不夹闭,其余手术步骤同 IR 组。再灌注24 h 后进行神经功能缺陷评分(neuro-logical severity scores,NSS);NSS 评分完成后处死小鼠,取脑组织测定脑梗死体积;Western blot 法检测小鼠脑组织 TAK1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1和 p62蛋白含量。结果 IR 组、T 组、Y 组和 NS 组NSS 评分和脑梗死体积百分比明显高于 C 组(P <0.05);T 组 NSS 评分和脑梗死体积百分比明显低于 IR 组(P <0.05)。IR 组、Y 组和 NS 组脑组织 TAK1蛋白含量明显高于 C 组(P <0.05);T 组脑组织 TAK1蛋白含量明显低于 IR 组(P <0.05)。IR 组、T 组、Y 组和 NS 组 LC3Ⅱ/LC3Ⅰ