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目的 探讨纤维网状细胞(FRC)通过促进线粒体凋亡对脓毒症急性肾损伤(AKI)的改善作用.方法 取10~12周龄的C57BL/6雄性小鼠分别进行小鼠原代肾小管上皮细胞(TECs)及小鼠肠系膜脂肪组织来源的FRC的分离培养,采用流式细胞术鉴定FRC和原代TECs、免疫荧光检测TECs AQP1的表达、油红染色鉴定FRC的干细胞特性.将TECs分为NC组、LPS组与LPS-FRC组,采用流式细胞术检测3组TECs JC-1单体百分比、qRT-PCR检测炎症因子[白细胞介素(IL)-1和IL-6]mRNA表达水平、Western Blot检测自噬相关蛋白(Pink1、PARKIN)及氧化应激蛋白(HO-1)表达水平、CCK-8试剂盒检测TECs活力并进行比较.结果 成功分离并鉴定FRC及小鼠原代TECs.LPS组IL-6、IL-1的mRNA表达水平和JC-1单体百分比均高于NC组及LPS-FRC组,LPS-FRC组IL-6、IL-1的mRNA表达水平均高于NC组(P<0.05).LPS组OD值低于NC组,LPS-FRC组OD值高于LPS组(P<0.05).和NC组比较,LPS组Pink 1、PARKIN、HO-1蛋白表达水平均增高;和LPS组相比,FRC-LPS组细胞Pink 1和PARKIN蛋白表达水平增加,HO-1蛋白表达水平降低(P<0.05).结论 FRC可促进TECs的线粒体自噬,改善脓毒症AKI.

作者:李一鸣;王冰清;胡畅;王月;锁进猛;彭志勇

来源:临床内科杂志 2022 年 39卷 6期

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作者:
李一鸣;王冰清;胡畅;王月;锁进猛;彭志勇
来源:
临床内科杂志 2022 年 39卷 6期
标签:
脓毒症急性肾损伤 纤维网状细胞 原代肾小管上皮细胞 线粒体膜电位 线粒体自噬
目的 探讨纤维网状细胞(FRC)通过促进线粒体凋亡对脓毒症急性肾损伤(AKI)的改善作用.方法 取10~12周龄的C57BL/6雄性小鼠分别进行小鼠原代肾小管上皮细胞(TECs)及小鼠肠系膜脂肪组织来源的FRC的分离培养,采用流式细胞术鉴定FRC和原代TECs、免疫荧光检测TECs AQP1的表达、油红染色鉴定FRC的干细胞特性.将TECs分为NC组、LPS组与LPS-FRC组,采用流式细胞术检测3组TECs JC-1单体百分比、qRT-PCR检测炎症因子[白细胞介素(IL)-1和IL-6]mRNA表达水平、Western Blot检测自噬相关蛋白(Pink1、PARKIN)及氧化应激蛋白(HO-1)表达水平、CCK-8试剂盒检测TECs活力并进行比较.结果 成功分离并鉴定FRC及小鼠原代TECs.LPS组IL-6、IL-1的mRNA表达水平和JC-1单体百分比均高于NC组及LPS-FRC组,LPS-FRC组IL-6、IL-1的mRNA表达水平均高于NC组(P<0.05).LPS组OD值低于NC组,LPS-FRC组OD值高于LPS组(P<0.05).和NC组比较,LPS组Pink 1、PARKIN、HO-1蛋白表达水平均增高;和LPS组相比,FRC-LPS组细胞Pink 1和PARKIN蛋白表达水平增加,HO-1蛋白表达水平降低(P<0.05).结论 FRC可促进TECs的线粒体自噬,改善脓毒症AKI.