目的 研究RNA干扰技术对大鼠主动脉内皮细胞血管紧张素原( AGT )表达的抑制. 方法 构建携带AGT基因特异短发夹RNA( shRNA)编码序列的质粒载体,与脂质体转染剂以最佳配比复合,转染传代3~5代的大鼠主动脉细胞,于转染后24 h、48 h、72 h在倒置荧光显微镜下检测转染效率,采用RT-PCR法检测AGT mRNA的表达水平,应用BCA蛋白定量试剂盒来测定大鼠内皮细胞的蛋白浓度,应用Wwestern blot法检测转染前和转染后的大鼠主动脉内皮细胞 AGT 的蛋白表达. 结果 ( 1 )当质粒与脂质体转染剂TMETAFECTENE EASY+以1:4的最佳配比复合时,转染48 h时细胞转染效率最高为(67.25 ±2.49)
作者:和姬苓;孙洪英;杨国安;徐莹;敖媛媛;张佳;刘晶
来源:临床神经病学杂志 2015 年 28卷 5期