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目的 观察血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)在顺铂诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)毒性损伤模型中mRNA的表达变化,探究VEGF-C对顺铂诱导人肾小管上皮细胞毒性损伤的作用和介导其作用的相关分子机制.方法 体外培养人近端肾小管上皮细胞系,用不同浓度的顺铂刺激HK-2细胞24 h后,利用实时荧光定量RT-PCR法检测HK-2细胞VEGF-C mRNA的表达变化,CCK8法检测不同浓度的顺铂对HK-2细胞存活率的影响.分别用0、50、100、200 ng/ml的人重组VEGF-C因子预培养HK-2细胞4h后,再加入50 μmol/L的顺铂和一定浓度的VEGF-C继续培养HK-2细胞24 h,利用CCK8法检测细胞存活率的变化,明确VEGF-C对顺铂诱导的肾小管上皮细胞毒性损伤的作用.用不同浓度的VEGF-C刺激HK-2细胞30min后,Western blot方法检测细胞p-Akt、Akt、p-Erk、Erk、p-p38及p38蛋白水平的变化.结果 不同浓度的顺铂刺激HK-2细胞后细胞VEGF-C mRNA水平的表达呈现先上升后下降的趋势.顺铂能引起HK-2细胞存活率减低,并呈现浓度依赖性.而外源性加入VEGF-C能减轻顺铂所导致的HK-2细胞毒性损伤,提高细胞的存活率,并且VEGF-C浓度为200 ng/ml时对HK-2细胞的保护作用最明显.不同浓度的VEGF-C刺激HK-2细胞30 min,随着VEGF-C浓度的增加,HK-2细胞p-Ak

作者:常晓艳;张颖;杨倩;黄帅;徐钢

来源:临床肾脏病杂志 2015 年 15卷 5期

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作者:
常晓艳;张颖;杨倩;黄帅;徐钢
来源:
临床肾脏病杂志 2015 年 15卷 5期
标签:
血管内皮生长因子C 顺铂 上皮细胞 Vascular endothelial growth factor-C Cisplatin Epithelial Cells
目的 观察血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)在顺铂诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)毒性损伤模型中mRNA的表达变化,探究VEGF-C对顺铂诱导人肾小管上皮细胞毒性损伤的作用和介导其作用的相关分子机制.方法 体外培养人近端肾小管上皮细胞系,用不同浓度的顺铂刺激HK-2细胞24 h后,利用实时荧光定量RT-PCR法检测HK-2细胞VEGF-C mRNA的表达变化,CCK8法检测不同浓度的顺铂对HK-2细胞存活率的影响.分别用0、50、100、200 ng/ml的人重组VEGF-C因子预培养HK-2细胞4h后,再加入50 μmol/L的顺铂和一定浓度的VEGF-C继续培养HK-2细胞24 h,利用CCK8法检测细胞存活率的变化,明确VEGF-C对顺铂诱导的肾小管上皮细胞毒性损伤的作用.用不同浓度的VEGF-C刺激HK-2细胞30min后,Western blot方法检测细胞p-Akt、Akt、p-Erk、Erk、p-p38及p38蛋白水平的变化.结果 不同浓度的顺铂刺激HK-2细胞后细胞VEGF-C mRNA水平的表达呈现先上升后下降的趋势.顺铂能引起HK-2细胞存活率减低,并呈现浓度依赖性.而外源性加入VEGF-C能减轻顺铂所导致的HK-2细胞毒性损伤,提高细胞的存活率,并且VEGF-C浓度为200 ng/ml时对HK-2细胞的保护作用最明显.不同浓度的VEGF-C刺激HK-2细胞30 min,随着VEGF-C浓度的增加,HK-2细胞p-Ak