目的:探讨原代鼠骨骼肌成肌细胞异位表达重组人生长激素(rhGH)的可行性.方法:将目的基因人生长激素(hGH)亚克隆至真核表达载体pcDNA3上,构建重组质粒pcDNA-hGH.分别用酶切电泳及DNA测序的方法对重组质粒进行鉴定.用阳离子聚合物SofastTM介导的基因转移技术将重组质粒导入体外培养的原代大鼠骨骼肌成肌细胞.收集细胞培养上清液,用放射免疫分析(RIA)的方法检测rhGH.结果:酶切电泳和DNA测序显示hGH cDNA成功地插入到空载体中;rhGH表达持续3周以上.结论:该实验成功构建了能在真核细胞内表达的重组质粒pcDNA-hGH,为进一步研究以组织进行的基因治疗奠定了基础.
作者：李锋；卢永昕；朱记法；田俊；王玉
来源：临床心血管病杂志 2004 年 20卷 8期
