目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对心脏成纤维细胞(CFs)氧化应激时一氧化氮合酶(NOs)系统的影响,以及P13-K/Akt信号途径在其中的作用.方法:应用胰酶和胶原酶双酶法分离培养新生大鼠CFs,EPO、过氧化氢(H2O2)和PI3-K抑制剂LY294002不同因素干预.化学酶法检测CFs培养液中的NO浓度以及总NOS和其亚型的活性.Western blot检测Akt、p-Akt、eNOS、iNOS蛋白的表达.结果:氧化应激使CFs中iNOS的表达显著上调,活性增强;eNOS蛋白的表达明显下降.同时CFs培养液中NO的合成增加显著,达到(25.94±2.57)μmol/L,是对照组的4倍多(P<0.01).EPO显著抑制CFs氧化应激时iNOS蛋白的表达,同时上调eNOS蛋白,总的NO浓度也显著下降.Akt磷酸化形式p-Akt的表达水平也明显提高.PI3-K抑制剂LY294002能阻断EPO促进eNOS和p-Akt蛋白表达的作用,但EPO抑制iNOS的作用不能完全被阻断.结论:EPO能促进新生大鼠CFs氧化应激时eNOS蛋白的合成,抑制iNOS蛋白的表达.其促进eNOS的表达是通过激活PI3-K/Akt细胞信号途径来实现,抑制iNOS的机制有待进一步探讨.
作者：张新金；马业新；文渊；徐雪晶
来源：临床心血管病杂志 2008 年 24卷 11期
