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目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心脏成纤维细胞(CFs)增殖的影响,以及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3-K/Akt)信号途径和一氧化氮合酶(NOS)的作用.方法:应用胰酶和胶原酶双酶和差速贴壁法分离培养新生大鼠CFs细胞,应用EPO、Ang Ⅱ、PI3-K抑制剂LY294002、NOS抑制剂L-NAME不同因素干预.细胞计数和MTT法作出CFs的生长曲线,检测CFs的增殖.化学酶法检测CFs培养液中的一氧化氮(NO)浓度以及总NOS和其亚型的活性.Western blotting检测Akt、p-Akt、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达.结果: Ang Ⅱ促CFs增殖的作用显著.EPO剂量依赖性的增加CFs培养液中的NO浓度,同时剂量依赖性的抑制Ang Ⅱ诱导的CFs增殖.在给药后第4 d,和单纯的Ang Ⅱ相比,浓度为5×103 U/L、1×104 U/L和2×104 U/L EPO对CFs增殖的抑制率分别达到了24.4

作者:张新金;马业新;文渊;徐雪晶

来源:中国病理生理杂志 2009 年 25卷 2期

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作者:
张新金;马业新;文渊;徐雪晶
来源:
中国病理生理杂志 2009 年 25卷 2期
标签:
促红细胞生成素 成纤维细胞 血管紧张素Ⅱ 一氧化氮合酶 1-磷脂酰肌醇3-激酶
目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的心脏成纤维细胞(CFs)增殖的影响,以及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3-K/Akt)信号途径和一氧化氮合酶(NOS)的作用.方法:应用胰酶和胶原酶双酶和差速贴壁法分离培养新生大鼠CFs细胞,应用EPO、Ang Ⅱ、PI3-K抑制剂LY294002、NOS抑制剂L-NAME不同因素干预.细胞计数和MTT法作出CFs的生长曲线,检测CFs的增殖.化学酶法检测CFs培养液中的一氧化氮(NO)浓度以及总NOS和其亚型的活性.Western blotting检测Akt、p-Akt、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达.结果: Ang Ⅱ促CFs增殖的作用显著.EPO剂量依赖性的增加CFs培养液中的NO浓度,同时剂量依赖性的抑制Ang Ⅱ诱导的CFs增殖.在给药后第4 d,和单纯的Ang Ⅱ相比,浓度为5×103 U/L、1×104 U/L和2×104 U/L EPO对CFs增殖的抑制率分别达到了24.4