目的:研究14-3-3蛋白在心肌细胞缺氧预处理中的表达及意义.方法:实验用SD新生大鼠(1~3 d龄),雌雄不拘,无菌取出乳鼠心脏,经分离附着组织,胰蛋白酶消化,纯化制成心肌细胞.在培养的第4 天随机分为3组:正常对照组、缺氧/复氧(A/R)组、缺氧预处理(APC)组.各组分别进行以下指标观察:①心肌细胞搏动频率;②细胞存活率(MTT法);③培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性;④透射电镜观察细胞超微结构;⑤ Western Blotting法检测14-3-3蛋白的表达变化.RT-PCR法检测14-3-3蛋白η、σmRNA的表达变化.结果:A/R组和APC组的14-3-3蛋白表达均上调,分别是正常对照组的(3.61±0.37)倍和(5.52±0.49)倍,A/R组和APC组与正常对照组比较、A/R组与APC组比较,均P<0.01.A/R组、APC组心肌细胞14-3-3η亚型mRNA分别为正常对照组的(1.82±0.30)倍、(2.93±0.52)倍,差异均有统计学意义(P<0.01);APC组与A/R组比较,差异亦有统计学意义(P<0.01).A/R组、APC组心肌细胞14-3-3σ亚型mRNA表达量分别为正常对照组的(1.13±0.18)倍、(1.21±0.14倍),A/R组、APC组与正常对照组比较, A/R组与APC组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:14-3-3η亚型mRNA可能参与心肌细胞APC后的早期保护作用.
作者：陈璿瑛；彭小平；廖章萍；刘丹；何明
来源：临床心血管病杂志 2010 年 26卷 2期
