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目的 探讨建立大鼠心肌细胞H9c2缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤模型的一种新方法.方法 实验使用大鼠心肌细胞H9c2,随机分为对照组和实验组,对照组常规培养不做处理,实验组分为缺氧2、4、8、12 h及缺氧后复氧2h组.缺氧时换不含血清的低糖DMEM培养基,再置入85% N2、10%H2、5% CO2缺氧环境.缺氧后,加入新鲜DMEM培养基,置入二氧化碳培养箱中继续培养2h.苔盼蓝染色检测细胞存活率,Annexin V/PI染色行流式细胞术检测细胞凋亡率,分光光度法检测培养基中的乳酸脱氢酶(LDH)含量.结果 大鼠心肌细胞经过H/R处理后,与对照组比,细胞存活率显著下降,LDH含量升高,细胞凋亡率显著增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 采用厌氧培养箱法建立大鼠心肌细胞H/R损伤模型简单易行,重复性好.

作者:夏中元;王宇;刘菊英

来源:临床误诊误治 2013 年 26卷 10期

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作者:
夏中元;王宇;刘菊英
来源:
临床误诊误治 2013 年 26卷 10期
标签:
心肌缺血 再灌注损伤 缺氧/复氧 细胞模型 大鼠 Myocardial ischemia Reperfusion injury Hypoxia/reoxygenation Cell model Rat
目的 探讨建立大鼠心肌细胞H9c2缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤模型的一种新方法.方法 实验使用大鼠心肌细胞H9c2,随机分为对照组和实验组,对照组常规培养不做处理,实验组分为缺氧2、4、8、12 h及缺氧后复氧2h组.缺氧时换不含血清的低糖DMEM培养基,再置入85% N2、10%H2、5% CO2缺氧环境.缺氧后,加入新鲜DMEM培养基,置入二氧化碳培养箱中继续培养2h.苔盼蓝染色检测细胞存活率,Annexin V/PI染色行流式细胞术检测细胞凋亡率,分光光度法检测培养基中的乳酸脱氢酶(LDH)含量.结果 大鼠心肌细胞经过H/R处理后,与对照组比,细胞存活率显著下降,LDH含量升高,细胞凋亡率显著增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论 采用厌氧培养箱法建立大鼠心肌细胞H/R损伤模型简单易行,重复性好.