目的:探讨重组腺病毒Ad-EGFP/hVEGF165介导的血管内皮细胞生长因子在骨髓移植后小鼠体内的表达效率及对骨髓造血干细胞恢复的影响.方法:利用细菌内同源重组法快速构建复制缺陷型腺病毒AdEGFP/hVEGF165,经尾静脉注射给同基因骨髓移植BALB/c小鼠;在移植后不同时间,通过荧光显微镜、RTPCR、免疫组化染色和ELISA方法检测外源基因在小鼠体内的表达;取移植后30 d小鼠骨髓单个核细胞并计数,随后进行脾集落形成单位试验(CFU-S)以评价VEGF基因转移组小鼠骨髓造血干细胞数量恢复情况.结果:重组腺病毒AdEGFP/hVEGF165介导的VEGF基因转移广泛分布在骨髓移植小鼠心、肺、肝、脾、肾、小肠和骨髓组织;小鼠血浆中VEGF浓度高峰出现在移植后2 d;接受重组腺病毒AdEGFP/hVEGF165基因干预治疗组小鼠骨髓单个核细胞计数及其形成的脾集落数量明显高于其他对照组.结论:腺病毒成功介导了hVEGF165基因在骨髓移植小鼠体内的稳定表达,明显促进骨髓移植小鼠骨髓造血干细胞数量的恢复,是骨髓单个核细胞数量增加的根本原因.
作者:仲照东;邹萍;游泳;郭荣;胡中波;刘凌波;黄士昂
来源:临床血液学杂志 2004 年 17卷 3期