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目的:探讨小干扰RNA(siRNA)靶向抑制细胞分裂周期相关蛋白(CDCA5)基因表达对人肝癌HepG2细胞株增殖及凋亡的影响。方法优化siRNA转染条件,将条靶向抑制CDCA5基因的siRNA载体片段(序列、2和)分别高效转染人肝癌HepG2细胞( A、B和C组),并设阴性对照组( NC组)及空白组。免疫印迹法检测转染h各组CDCA5蛋白的表达水平。 CCK-8法检测转染、48、72、96、120h各组细胞的增殖能力,Annexin V-FITC/PI 双标记流式细胞术检测各组转染h的凋亡情况。结果 A、B和C组的CDCA5蛋白水平均低于NC组和空白组( P<0.05),其中B组的表达率最低,抑制率最高,达.3%,故选择序列进行后续实验。自转染h起,B组的相对增殖率均低于NC组和空白组( P<0.05);B组转染h的相对增殖率为(66.58±2.58)%,均低于其他观察时间点(P<0.05)。 B组转染h的早期和晚期凋亡率分别为(17.43±2.31)%和(22.37±2.21)%,均高于NC组和空白组(P<0.05)。结论通过siRNA能够降低HepG2细胞的CDCA5表达水平,有效抑制HepG2细胞的增殖并促进其凋亡。

作者:陈墅圳;聂玉强;杜艳蕾;徐言;沈桂佳

来源:临床肿瘤学杂志 2014 年 2期

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作者:
陈墅圳;聂玉强;杜艳蕾;徐言;沈桂佳
来源:
临床肿瘤学杂志 2014 年 2期
标签:
小干扰RNA 肝癌 细胞分裂周期相关蛋白5 增殖 凋亡 Small interfering RNA Hepatocacinoma Cell division cycle associated 5 Proliferation Apoptosis
目的:探讨小干扰RNA(siRNA)靶向抑制细胞分裂周期相关蛋白(CDCA5)基因表达对人肝癌HepG2细胞株增殖及凋亡的影响。方法优化siRNA转染条件,将条靶向抑制CDCA5基因的siRNA载体片段(序列、2和)分别高效转染人肝癌HepG2细胞( A、B和C组),并设阴性对照组( NC组)及空白组。免疫印迹法检测转染h各组CDCA5蛋白的表达水平。 CCK-8法检测转染、48、72、96、120h各组细胞的增殖能力,Annexin V-FITC/PI 双标记流式细胞术检测各组转染h的凋亡情况。结果 A、B和C组的CDCA5蛋白水平均低于NC组和空白组( P<0.05),其中B组的表达率最低,抑制率最高,达.3%,故选择序列进行后续实验。自转染h起,B组的相对增殖率均低于NC组和空白组( P<0.05);B组转染h的相对增殖率为(66.58±2.58)%,均低于其他观察时间点(P<0.05)。 B组转染h的早期和晚期凋亡率分别为(17.43±2.31)%和(22.37±2.21)%,均高于NC组和空白组(P<0.05)。结论通过siRNA能够降低HepG2细胞的CDCA5表达水平,有效抑制HepG2细胞的增殖并促进其凋亡。