目的：构建甲胎蛋白（AFP）介导的以沉默胰岛素样生长因子1型受体（IGF1R）和表达野生型p53（Wtp53）的重组慢病毒，探讨该慢病毒载体对肝癌干细胞CD45－CD90＋双靶点基因系统（ IGF1R和Wtp53）和对体内肝癌生长的抑制作用。方法从肝癌细胞 Hep3B 系中分离出肝癌干细胞 CD45－CD90＋细胞亚群，用携带 AFP?Wtp53?pPRIME?miR30?shRNA?IGF1R融合基因的慢病毒进行体外转染。利用RT?PCR和Western blotting检测IGF1R、WtP53在细胞内的表达，将荷人肝癌的移植瘤裸鼠随机分为空白对照组（腋下接种未感染任何病毒的CD45?CD90＋细胞）、空载体对照组（腋下接种感染空载体慢病毒pPRIME的CD45－CD90＋细胞）和实验组（腋下接种感染空载体慢病毒AFP?WtP53?pPRIME?miR30?shRNA?IGF1R的CD45－CD90＋细胞），检测各组的IGF1R表达，微血管密度和细胞凋亡程度。结果成功构建anti?AFP 介导的慢病毒；qRT?PCR和Western blotting检测显示，anti?AFP介导的慢病毒能表达Wtp53并同时干扰IGF1R的表达。体内实验显示，与空白对照组和空载体对照组相比，实验组肿瘤的潜伏期较长，肿瘤体积较小，瘤组织的IGF1R水平、微血管密度较低，但凋亡指数较高，差异有统计学意义（ P＜0?05）。结论 anti?AFP介导的慢病毒可高效特异性转染肝癌干
作者：王轩；王欣；袁振华；夏冰祥；张业伟
来源：临床肿瘤学杂志 2015 年 11期
