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目的 探讨斑蝥酸钠对结肠癌细胞凋亡及p53上调凋亡控制因子(PUMA)表达的影响.方法 采用不同浓度斑蝥酸钠(0.1、0.25、0.5、1、2μg/ml)处理结肠癌细胞HCT116 24 h,并设不加药对照组.测量其单层细胞跨膜电阻值(TER)以评价斑蝥酸钠对HCT116细胞凋亡的影响,同时采用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测HCT116细胞的PUMA mRNA和蛋白水平变化;HCT116细胞经0.05、0.1、0.2、0.4、0.8μg/ml抑制性κB激酶β(IKKβ)质粒转染或10、20、40、80 nmoVL核因子(NF)-κB抑制剂(BAY 11-7082)处理后,采用Western blotting检测其PUMA蛋白水平.结果 与对照组比较,各浓度斑蝥酸钠处理后HCT116细胞的TER降低,PUMA mRNA和蛋白水平升高,且以上效应呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.05);与未处理的HCT116细胞相比,IKKβ质粒转染后,PUMA蛋白表达增加,而BAY 11-7082可降低斑蝥酸钠对PUMA的上调作用,差异有统计学意义(P<0.05).结论 斑蝥酸钠可通过NF-κB通路上调PUMA的表达,进一步诱导结肠癌细胞HCT116的凋亡.

作者:张霞;关洪全

来源:临床肿瘤学杂志 2016 年 21卷 1期

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作者:
张霞;关洪全
来源:
临床肿瘤学杂志 2016 年 21卷 1期
标签:
斑蝥酸钠 结肠癌 核因子-κB(NF-κB) p53上调凋亡控制因子(PUMA) 凋亡 Sodium cantharidinate Colon cancer Nuclear factor-κB (NF-κB) p53-upregulated modulator of apoptosis(PUMA) Apoptosis
目的 探讨斑蝥酸钠对结肠癌细胞凋亡及p53上调凋亡控制因子(PUMA)表达的影响.方法 采用不同浓度斑蝥酸钠(0.1、0.25、0.5、1、2μg/ml)处理结肠癌细胞HCT116 24 h,并设不加药对照组.测量其单层细胞跨膜电阻值(TER)以评价斑蝥酸钠对HCT116细胞凋亡的影响,同时采用实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测HCT116细胞的PUMA mRNA和蛋白水平变化;HCT116细胞经0.05、0.1、0.2、0.4、0.8μg/ml抑制性κB激酶β(IKKβ)质粒转染或10、20、40、80 nmoVL核因子(NF)-κB抑制剂(BAY 11-7082)处理后,采用Western blotting检测其PUMA蛋白水平.结果 与对照组比较,各浓度斑蝥酸钠处理后HCT116细胞的TER降低,PUMA mRNA和蛋白水平升高,且以上效应呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.05);与未处理的HCT116细胞相比,IKKβ质粒转染后,PUMA蛋白表达增加,而BAY 11-7082可降低斑蝥酸钠对PUMA的上调作用,差异有统计学意义(P<0.05).结论 斑蝥酸钠可通过NF-κB通路上调PUMA的表达,进一步诱导结肠癌细胞HCT116的凋亡.