目的 探讨微小RNA-375 (miR-375)和人类配对盒基因6(PAX6)在宫颈癌顺铂耐药株HeLa cisR中的表达及耐药逆转作用并初步探讨可能机制.方法 采用实时定量PCR(QPCR)检测28例正常宫颈组织、30例宫颈癌组织(14例顺铂敏感和16例顺铂不敏感)和不同顺铂敏感性细胞HeLa、HeLa cisR中miR-375、PAX6 mRNA水平,采用脂质体法向HeLa和HeLa cisR细胞转染含miR-375模拟物(mimics)的寡核苷酸探针(过表达组)和阴性对照NC(阴性对照组),以不行任何转染的为空白对照组.采用QPCR检测转染后HeLa和HeLa cisR细胞中miR-375和PAX6 mRNA水平,采用MTI法检测不同浓度顺铂(1、3、10、30、100 μmol/L)处理后的增殖情况并计算半数抑制浓度(IC50)以评价顺铂敏感性,Western blotting检测PAX6蛋白水平,双荧光素酶报告基因试验评价miR-375对PAX6的靶向调控作用.结果 宫颈癌组织中的miR-375水平低于正常宫颈组织(0.714±0.341vs1.006±0.299),PAX6 mRNA水平高于正常宫颈组织(1.855±0.928vs.1.011±0.257),miR-375水平与PAX6 mRNA水平呈负相关(r=-0.416,P<0.05).与化疗敏感组相比,化疗不敏感组的miR-375水平降低,而PAX6 mRNA水平升高(P<0.05).HeLa cisR细胞的miR-375水平低于HeLa细胞(0.365±0.098vs.1.032±0.135),而PAX6mRNA水平高于HeLa细
作者:蒋莉莎;陆义红;水丽君;邓敏
来源:临床肿瘤学杂志 2018 年 23卷 6期