目的 探讨沉默烯酰辅酶A水合酶短链1(ECHS1)表达对结肠癌HT-29细胞自噬的影响及可能作用机制.方法 将ECHS1 shRNA质粒及阴性质粒转染入HT-29细胞为shECHS1组和NC组,另设空白对照组,实时荧光定量PCR(QPCR)检测各组ECHS1表达.采用MTT法和流式细胞术检测3组细胞增殖和凋亡的情况.Western blotting法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ)和Beclin 1以及相关信号通路蛋白:转化生长因子活化激酶1(TAK1)、腺氨酸活化蛋白激酶α1(AMPKα1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的水平.采用免疫荧光技术观察细胞自噬情况.结果 shECHS1组HT-29细胞ECHS1表达量为0.23±0.05,明显低于空白对照组的0.78±0.09和NC组的0.76±0.09,差异有统计学意义(P＜0.05).shECHS1组48、72、96 h吸光值分别为0.62±0.10、0.75±0.11、0.81±0.08,均明显低于空白对照组和NC组,差异有统计学意义(P＜0.05).shECHS1组48 h细胞凋亡率为(59.86±3.10)％,高于空白对照组的(27.48±2.25)％和NC组的(27.62±2.59)％,差异有统计学意义(P＜0.05).shECHS1组细胞Beclin 1、LC3-Ⅱ、TAK1、AMPKα1、PPARγ蛋白表达分别为0.76±0.12、0.49±0.07、0.93±0.15、0.57±0.08、0.46±0.09,高于空白对照组和NC组(P＜0.05).加入AMPK特异性抑制剂SZ4003作用48 h

作者：王艳良；张燕忠；王连臣；任庆；华海琴

来源：临床肿瘤学杂志 2019 年 24卷 12期