目的 探讨微小RNA-130b(miR-130b)对第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物基因(PTEN)的靶向调控及骨肉瘤(OS)MG-63细胞上皮间质转化(EMT)的影响.方法 从美国国家生物技术信息中心的GEO数据库中下载基因表达谱OS样本数据集GSE39058、GSE79181的series matrix数据分别用于分析OS组织的miR-130b水平及与预后的关系.采用脂质体法将miR-130b抑制剂转染至MG-63(抑制组),同时设置未转染组和空白对照组,活细胞计数CCK-8和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测增殖活力和凋亡率,实时定量PCR和Western blotting检测PTEN及上皮表型标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)和间质表型标志物波形蛋白(Vimentin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的水平,在线预测miR-130b与PTEN的靶向结合序列并利用双荧光素酶报告基因实验验证两者的靶向关系.结果 GSE39058数据集显示,65例OS患者的组织miR-130b水平为11.040±1.008,高于26例化疗后切除组织的9.614±1.154(P<0.05);GSE79181数据集显示,miR-130b低水平组的中位生存期为2823天,优于高水平组的1463天(P<0.05).抑制组的miR-130b水平为0.038±0.006,低于未转染组的1.160±0.137和空白对照组的1.049±0.089;抑制组的凋亡率为(17.672±1.664)%,高于未转染组的(7.975±0.364)%和空白对照
作者:林兰;王祎萌;郑琳麟
来源:临床肿瘤学杂志 2020 年 25卷 8期