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[目的]研究转染人乳头状瘤病毒18型(HPV18)后,甲基硝基亚硝基胍(MNNG)暴露对人食管上皮Het-1A细胞周期和增殖、凋亡功能的影响.[方法]通过慢病毒介导稳定转染HPV 18 E6、E7基因到人食管上皮Het-1A细胞中,荧光定量PCR检测E6和E7相对表达量后得到稳定表达株.应用MTT法观察MNNG(0、1、5、10 μmol/L)染毒处理24h后对转染组和对照组细胞增殖功能的影响.应用流式细胞术检测转染组和对照组细胞染毒后细胞周期和凋亡的变化.[结果] HPV18转染组与对照组相比,细胞增殖能力增强,G1期延长,S期缩短(P<0.05),且凋亡率下降(P<0.05).非转染细胞中MNNG染毒各组与未染毒组相比,细胞增殖活性受到抑制,G1期延长,细胞凋亡率增加(P<0.05).HPV18转染后MNNG暴露,可导致G2期延长;MTT检测细胞增殖结果显示HPV18转染组细胞在MNNG作用下,细胞存活率均高于同浓度MNNG单独暴露的非转染组细胞;中、低浓度MNNG暴露后HPV18转染组较未转染组相比细胞凋亡率降低(P<0.05).[结论] Het-1A细胞转染HPV18后暴露MNNG,细胞凋亡受到一定程度抑制,促进细胞增殖.由此可能导致细胞不断积累MNNG引起的基因突变和DNA损伤.

作者:李仪楠;马月;郑雨虹;刘冉;浦跃朴;尹立红

来源:环境与职业医学 2017 年 34卷 6期

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作者:
李仪楠;马月;郑雨虹;刘冉;浦跃朴;尹立红
来源:
环境与职业医学 2017 年 34卷 6期
标签:
人乳头状瘤病毒18 甲基硝基亚硝基胍 人食管上皮Het-1A细胞 human papillomavirus18 (HPV18) N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) human esophageal epithelial cell line Het-1A
[目的]研究转染人乳头状瘤病毒18型(HPV18)后,甲基硝基亚硝基胍(MNNG)暴露对人食管上皮Het-1A细胞周期和增殖、凋亡功能的影响.[方法]通过慢病毒介导稳定转染HPV 18 E6、E7基因到人食管上皮Het-1A细胞中,荧光定量PCR检测E6和E7相对表达量后得到稳定表达株.应用MTT法观察MNNG(0、1、5、10 μmol/L)染毒处理24h后对转染组和对照组细胞增殖功能的影响.应用流式细胞术检测转染组和对照组细胞染毒后细胞周期和凋亡的变化.[结果] HPV18转染组与对照组相比,细胞增殖能力增强,G1期延长,S期缩短(P<0.05),且凋亡率下降(P<0.05).非转染细胞中MNNG染毒各组与未染毒组相比,细胞增殖活性受到抑制,G1期延长,细胞凋亡率增加(P<0.05).HPV18转染后MNNG暴露,可导致G2期延长;MTT检测细胞增殖结果显示HPV18转染组细胞在MNNG作用下,细胞存活率均高于同浓度MNNG单独暴露的非转染组细胞;中、低浓度MNNG暴露后HPV18转染组较未转染组相比细胞凋亡率降低(P<0.05).[结论] Het-1A细胞转染HPV18后暴露MNNG,细胞凋亡受到一定程度抑制,促进细胞增殖.由此可能导致细胞不断积累MNNG引起的基因突变和DNA损伤.