[目的]研究邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP)对小鼠胚胎干细胞多能性维持能力的影响.[方法]不同浓度的MEHP(0、0.1、1、10、100、1000 μmol/L)处理小鼠胚胎干细胞(mESCs)4d,观察细胞形态,采用流武细胞术检测细胞凋亡指标;应用碱性磷酸酶染色法、real-time PCR及Western blot分别检测其分化情况、胚胎干细胞多能性相关转录因子SOX2、OCT4基因及其蛋白表达水平.[结果]随着MEHP染毒浓度的增加,mESCs克隆的细胞团逐渐缩小,且数量也出现减少,以1000 μmol/L组尤为明显;细胞凋亡检测结果发现,随着染毒浓度增加,凋亡率呈增加趋势,与对照组相比,仅1000 μmol/L组mESCs总细胞凋亡率[(9.58±2.02)％]的升高有统计学意义(P＜0.05).碱性磷酸酶染色结果显示,1000 μmol/L组mESCs着色较浅,甚至未着色,即出现分化倾向,而其他组mESCs均被染成深蓝色或蓝紫色.与对照组相比,100、1000 μmol/L组中SOX2、OCT4基因表达降低(均P＜0.05);1000μmol/IL组SOX2、OCT4蛋白表达降低(均P＜0.05).[结论]一定浓度MEHP对mESCs存在细胞毒性,抑制mESCs正常生长,降低mESCs中多能性相关转录因子SOX2、OCT4的表达,进而影响胚胎早期发育.
作者：李玉秋；马林；王天昱；李鑫；张康；马明月
来源：环境与职业医学 2018 年 35卷 3期
