[背景]矽肺发生涉及多细胞、多因子的变化和相互作用,其中成纤维细胞是肺纤维过程中关键的效应细胞.近年来研究发现,成纤维细胞的增殖除了受转化生长因子-β等细胞因子的调节之外,外泌体作为细胞间信号的载体也在其中发挥重要的作用.外泌体miRNAs介导的细胞间信号可能在SiO2诱导的成纤维细胞转分化和增殖中发挥作用.前期研究发现miR-125a-5p是一条差异表达的miRNAs.[目的]探讨外泌体miR-125a-5p对小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3增殖和凋亡的影响.[方法]培养RAW264.7细胞,收取上清提取外泌体,并采用透射电镜、纳米颗粒跟踪分析和Western blot对其进行鉴定.设立对照组和SiO2组(100 μg/mL SiO2),观察SiO2粉尘对RAW264.7细胞外泌体及其中miR-125a-5p表达的影响.建立RAW264.7与NIH/3T3的共培养模型,分为对照组、SiO2组(100 μg/mL)和外泌体组(10 μg/mL外泌体作用于NIH/3T3,并且该组无RAW264.7),24、48h时采用Western blot和CCK-8检测NIH/3T3细胞Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达和增殖活性.培养NIH/3T3细胞,分为模拟剂组、抑制剂组和对照组,于转染24、48h后收集细胞,采用荧光定量PCR、CCK-8和流式细胞术分别检测NIH/3T3细胞中miR-125a-5p的表达、细胞的增殖活性、细胞周期和凋亡的情况.[

作者：张建会；王永星；郝长付；于兴浩；黄婼旋；魏静静；杨果；姚武

来源：环境与职业医学 2019 年 36卷 7期