目的 观察miR-125a-5p在人多发性骨髓瘤细胞系U266中的表达变化及其对细胞增殖的影响,并探讨其机制是否与维生素D受体(VDR)有关.方法 取生长状态良好的U266细胞、人正常骨髓原代细胞,采用实时荧光定量PCR法检测miR-125a-5p表达,采用Western blotting法检测VDR蛋白表达.TargetScan软件分析及双荧光素酶报告基因实验证实VDR是miR-125a-5p的作用靶点.将U266细胞分为inhibitor组、inhibitor+si-VDR组和空白对照组,分别转染miR-125a-5p-inhibitor+si-Con质粒、miR-125a-5p inhibitor+si-VDR质粒、miR-NC+si-Con质粒.采用CCK-8法检测各组转染后0、24、48、72 h的光密度(OD)值,集落形成实验对各组转染24 h的集落形成个数进行计数.结果 U266细胞、人正常骨髓原代细胞miR-125a-5p相对表达量分别为2.79±0.65、1,VDR蛋白相对表达量分别为0.27±0.06、1,二者比较P均<0.01.inhibitor组、inhibitor+si-VDR组和空白对照组培养48、72 h的OD值以及集落形成个数均依次升高,组间两两比较P均<0.05.结论 U266细胞中miR-125a-5p表达升高,miR-125a-5p可通过负性调控VDR表达而促进细胞增殖.
作者：赵进；王昌敏
来源：山东医药 2020 年 60卷 23期
