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[背景]双酚A (BPA)是一种典型的具有拟雌激素作用的环境内分泌干扰物.越来越多的研究显示,BPA暴露与人类2型糖尿病(T2DM)发生呈正相关,但其作用机制尚不清楚.探讨BPA对糖代谢的影响具有非常重要的意义.[目的]探讨双酚A对大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1细胞)凋亡及胰岛素分泌水平的影响.[方法]常规培养INS-1细胞,待细胞贴壁后,用含不同浓度BPA(6、30、150 μmol·L-1)的RPMI1640培养基进行染毒,以DMSO为溶剂(终浓度≤0.1%).采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTr)检测BPA对INS-1细胞存活率的影响;流式细胞术检测BPA对INS-1细胞凋亡率的影响;活性氧(ROS)试剂盒检测BPA染毒对INS-1细胞ROS水平的影响;葡萄糖刺激胰岛素分泌实验检测不同浓度BPA对INS-1细胞胰岛素分泌的影响;荧光定量聚合酶链反应、蛋白质印迹法分别检测BPA对INS-1细胞Bcl-2、Bax、半胱天冬酶(caspase)3基因及其蛋白表达水平的影响.[结果]与DMSO溶剂对照组比较,30 μmol·L-1 BPA组INS-1细胞存活率增高,150 μmol·L-1 BPA组细胞存活率降低(P<0.01).流式细胞术检测结果显示:6、150 μmol·L-1 BPA组INS-1细胞总凋亡率增高(均P<0.05).6、30、150 μmol·L-1 BPA组INS-1细胞内ROS含量增加(均P<0.05).葡萄糖刺激胰岛素分泌实验结果显示:在基础浓度

作者:李丽萍;王乐;德小明;李玲;张亚娟;朱丽敏

来源:环境与职业医学 2020 年 37卷 6期

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作者:
李丽萍;王乐;德小明;李玲;张亚娟;朱丽敏
来源:
环境与职业医学 2020 年 37卷 6期
标签:
双酚A INS-1细胞 细胞凋亡 Bcl-2 Bax caspase3 cleaved-caspase3
[背景]双酚A (BPA)是一种典型的具有拟雌激素作用的环境内分泌干扰物.越来越多的研究显示,BPA暴露与人类2型糖尿病(T2DM)发生呈正相关,但其作用机制尚不清楚.探讨BPA对糖代谢的影响具有非常重要的意义.[目的]探讨双酚A对大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1细胞)凋亡及胰岛素分泌水平的影响.[方法]常规培养INS-1细胞,待细胞贴壁后,用含不同浓度BPA(6、30、150 μmol·L-1)的RPMI1640培养基进行染毒,以DMSO为溶剂(终浓度≤0.1%).采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTr)检测BPA对INS-1细胞存活率的影响;流式细胞术检测BPA对INS-1细胞凋亡率的影响;活性氧(ROS)试剂盒检测BPA染毒对INS-1细胞ROS水平的影响;葡萄糖刺激胰岛素分泌实验检测不同浓度BPA对INS-1细胞胰岛素分泌的影响;荧光定量聚合酶链反应、蛋白质印迹法分别检测BPA对INS-1细胞Bcl-2、Bax、半胱天冬酶(caspase)3基因及其蛋白表达水平的影响.[结果]与DMSO溶剂对照组比较,30 μmol·L-1 BPA组INS-1细胞存活率增高,150 μmol·L-1 BPA组细胞存活率降低(P<0.01).流式细胞术检测结果显示:6、150 μmol·L-1 BPA组INS-1细胞总凋亡率增高(均P<0.05).6、30、150 μmol·L-1 BPA组INS-1细胞内ROS含量增加(均P<0.05).葡萄糖刺激胰岛素分泌实验结果显示:在基础浓度