设计三条引物P1、Pz、P3扩增全长hFas基因和只含有跨膜区和胞浆区的mFas基因.P2上设计一个BstXI位点,以与hFas信号肽之后的单酶切位点BstXI连接,获得带信号肽的跨膜区和胞浆区SpmFas基因.另外设计两条引物P4、P5扩增人β-雌二醇受体的激素结合结构域.扩增基因均经DNA序列分析得到证实.P3、P4均设计了Kpn I位点,用于两基因融合,并将此融合基因插入真核表达载体pcDNA3.脂质体法转入COS-7细胞进行瞬时表达,western B1ot检测到约57KDa的表达产物,与融合基因的估算分子量相符.
作者:孙蕾;王会信;周廷冲
来源:免疫学杂志 1999 年 15卷 1期