目的探索对结核病DNA疫苗进行基因修饰的新方法.方法以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,通过PCR扩增获得结核杆菌Ag85A抗原蛋白基因的成熟肽编码区,以经PHA诱导后的小鼠脾组织总RNA为模板,通过RT-PCR获得小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的cDNA,将二者定向克隆入质粒pBK-CMV中构建含嵌合目的基因的重组质粒,转染培养的COS7细胞后检测嵌合目的基因的表达.结果成功构建了小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子cDNA与结核杆菌Ag85A抗原基因的真核嵌合表达质粒, 重组质粒能在COS7细胞中进行稳定表达.结论本研究首次将细胞因子基因与结核杆菌免疫保护性抗原基因嵌合构建嵌合DNA疫苗,为进一步研究其在动物体内的免疫原性和免疫保护性奠定了基础.
作者：谢勇恩；鲍朗；张会东；陈玮
来源：免疫学杂志 2003 年 19卷 2期
